[发明专利]生产丝状真菌培养产物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及使用液体培养基生产丝状真菌培养产物的方法，具体而言，涉及生产丝状真菌培养产物的方法，其中在培养丝状真菌的同时，控制营养物从培养原材料中向培养系统释放率从而调节丝状真菌培养产物中的酶生产力。

背景技术

为了生产发酵食品和饮料如烧酒(shochu)，使用一种丝状真菌，曲霉。通过固体培养方法培养曲霉，其中使曲霉生长在谷物的表面上，即被称为固体曲方法。使用固体曲的方法是一种传统生产方法。然而，所述方法是一种特定的培养方法，即固体培养，因此不适合于大规模的生产。

另一个方面，作为通过液体培养曲霉获得的曲霉的培养产物的液体曲可以容易地控制培养物，并且是一种进行有效生产的适合的培养方法。然而，已经公知的是，液体曲不能提供生产发酵食品和饮料如烧酒酿造所需的足够的酶活性(见，非专利文献1-4)。因此，很少有将液体曲用于实际生产的实例。

在通过液体培养丝状真菌包括曲霉来生产酶中，已经了解的是，通过控制降低营养物如葡萄糖在培养系统中的浓度来提高酶的生产力。一般地，营养物如糖的浓度被流加培养方法所抑制，其中营养物如糖从培养系统外渐渐加入。然而，预期开发更简单的方法(见，非专利文献5-6)。

我们已经开发了生产包含足量的酶如葡糖淀粉酶和酸稳定性α-淀粉酶的曲霉培养产物的方法，其通过使用液体培养基培养曲霉进行，其中所述原材料被皮或壳所覆盖，并已经提交了专利申请(见，日本专利申请号2004-350661，2004-352320，2004-352324，2004-378453，2005-290651，和2005-290648的说明书)。然而，尚不了解怎样在生产方法中生产高产量的酶的机制，怎样基于该机制调节曲霉培养产物中的酶生产力的方法，和怎样调节除了曲霉之外的丝状真菌的酶生产力的方法。

在另一方面，已经提出了一种通过使用在液体培养基中培养获得的酶液体，来液化未煮和未蒸过的淀粉的方法，所述液体培养基包含未煮和未蒸过的原材料，矿物质等，具有极高的糖化未煮和未蒸过的淀粉能力的伏革菌属(Corticium)的新菌株(见，专利文献1)。还提出了生产日本米酒的方法，其中上述酶液体与未煮和未蒸过的原材料反应(见，专利文献2)。然而，伏革菌属是一种bacidiomycetes，因此，其显著不同于广泛用于生产发酵食品和饮料的曲霉。此外，专利文献1和专利文献2描述黑曲霉(泡盛曲霉(Aspergillus awamori))和根霉属(Rhizopus)在糖化作用能力上不足。在酶液体是否具有足够的酸稳定性α-淀粉酶活性上尚不清楚。

非专利文献1：Hata Y.等：J.Ferment.Bioeng.(发酵生物工程杂志)，84，532-537(1997)

非专利文献2：Hata Y.等：Gene.(基因)，207，127-134(1998)

非专利文献3：Ishida H.等：J.Ferment.Bioeng.(发酵生物工程杂志)，86，301-307(1998)

非专利文献4：Ishida H.等：Curr.Genet.(当代基因)，37，373-379(2000)

非专利文献5：Bhargava S.等：Biotechnol Bioeng.(生物技术生物工程)，82(1)，111-7(2003)

非专利文献6：Pedersen H.等：Appl Microbiol Biotechnol.(应用微生物生物技术)，53(3)：272-7(2000)

专利文献1：JP H05-068237 B

专利文献2：JP H06-053059 B

发明内容

本发明待解决的问题

本发明的一个目的是提供通过使用包含选自由谷物，豆类，块茎，苋属(amaranthus)和藜属(quinoa)植物组成的组的至少一种作为培养原材料的液体培养基调节在丝状真菌培养产物中的酶的生产力的方法，所述酶具体而言指淀粉分解酶，植物纤维降解酶和蛋白水解酶，其中在丝状真菌培养的同时，控制营养物从作为培养原材料的谷物向培养系统中的释放率。解决问题的方法

本发明的发明人已经进行广泛研究以解决上述问题，结果发现当将覆盖有皮的原材料用作液体培养基的原材料时，可能通过调节原材料的脱壳比率来控制作为营养物之一的葡萄糖向液体培养基中的释放率。通过使用具有不同脱壳比率的原材料培养丝状真菌，结果发现丝状真菌培养产物中的酶生产力是可以由脱壳比率所控制的。