[发明专利]分离核酸的方法无效
申请号: | 200680034578.2 | 申请日: | 2006-09-19 |
公开(公告)号: | CN101268189A | 公开(公告)日: | 2008-09-17 |
发明(设计)人: | 凯文·麦克纳;裘奈德·席奥汀 | 申请(专利权)人: | 亚钧阔特生命科学公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京银龙知识产权代理有限公司 | 代理人: | 钟晶 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 核酸 方法 | ||
1.一种分离细胞或有机体的基因组核酸的方法,其包含:
a)合并
i)固相载体,其表面上已结合可逆结合核酸的官能团,
ii)细胞或有机体,以及
iii)试剂,其中所述试剂使得所述细胞或所述有机体溶解且所述细胞或所述有机体的基因组核酸沉淀于所述固相载体上;
从而产生组合;
b)将该组合保持在所述细胞或有机体发生溶解且所述细胞或有机体的基因组核酸与所述固相载体可逆地结合的条件下,从而产生具有与固相载体结合的所述细胞或有机体的基因组核酸的固相载体;以及
c)将所述固相载体从该组合中分离;
从而分离所述细胞或有机体的所述基因组核酸。
2.根据权利要求1所述的方法,其进一步包含使c)的所述固相载体与使得所述细胞或有机体的基因组核酸从所述固相载体洗脱的洗脱缓冲液接触。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述固相载体为磁性微粒。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述磁性微粒具有包被表面,其中所述包被表面选自由羧基包被表面和胺基包被表面组成的组中。
5.根据权利要求1所述的方法,其中所述试剂包含醇。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述醇选自由乙醇、异丙醇和聚烷撑二醇所组成的组中。
7.根据权利要求1所述的方法,其中所述试剂进一步包含盐。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述盐选自由NaCl、LiCl和MgCl2所组成的组中。
9.根据权利要求2所述的方法,其中洗脱缓冲液包含水。
10.根据权利要求1所述的方法,其中所述固相载体使用选自由以下方法所组成的组中的方法从组合中分离:施加磁场、施加真空过滤和施加离心。
11.根据权利要求1所述的方法,其中所述细胞选自由细菌细胞、血细胞、培养细胞、颊细胞和它们的组合所组成的组中;且所述有机体为病毒。
12.根据权利要求11所述的方法,其中所述病毒为肝炎病毒。
13.根据权利要求1所述的方法,其中所述基因组核酸为DNA或RNA。
14.根据权利要求1所述的方法,其中所述方法进一步包含使步骤b)中的所述固相载体与选自由以下各试剂所组成的组中的试剂接触:移除或消化DNA的试剂、移除或消化RNA的试剂、移除或消化蛋白质的试剂和它们的组合。
15.一种分离细胞或有机体的基因组核酸的方法,其包含:
a)合并细胞或有机体和使得所述细胞或有机体溶解的试剂,从而产生第一组合;
b)将所述第一组合保持在所述细胞或有机体发生溶解的条件下,从而产生溶解产物;
c)合并所述溶解产物与结合缓冲液,所述结合缓冲液包含固相载体,该固相载体表面上已结合可逆结合核酸的官能团;和试剂,该试剂使得所述细胞或有机体的基因组核酸沉淀在所述固相载体上,从而产生第二组合;
d)将所述第二组合保持在所述细胞或有机体的基因组核酸与所述固相载体可逆结合的条件下,从而产生具有与固相载体结合的所述细胞或有机体的基因组核酸的固相载体;
e)将所述固相载体从所述第二组合分离;以及
从而分离所述细胞或有机体的基因组核酸。
16.根据权利要求15所述的方法,其进一步包含使d)的所述固相载体与洗脱缓冲液接触,所述洗脱缓冲液使得所述细胞或有机体的基因组核酸从所述固相载体洗脱。
17.根据权利要求15所述的方法,其中所述磁性微粒具有包被表面,其中所述包被表面选自由羧基包被表面和胺基包被表面所组成的组中。
18.根据权利要求15所述的方法,其中所述结合缓冲液包含醇。
19.根据权利要求18所述的方法,其中所述醇选自由乙醇、异丙醇和聚烷撑二醇所组成的组中。
20.根据权利要求15所述的方法,其中所述结合缓冲液进一步包含盐。
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