[发明专利]片状组合物

说明书

技术领域

本发明涉及使用羊膜的片状组合物及其制作方法。本发明的片状组合物可以用作例如用于制作人工组织(角膜上皮片等)的培养基质、眼表面或皮肤等再建用的移植材料、或者抗粘连剂。

背景技术

羊膜具有活体适合性高、富有柔软性等作为移植材料而优选的特性，正在谋求在以角膜上皮的再建为代表的各种组织再建中的利用(例如参照专利文献1～4)。羊膜的利用方法大致可划分为两种。即，谋求羊膜直接应用于患处的组织再建的方法和羊膜作为细胞培养用基质而使用的方法。对于这些中的任一种利用方法而言，羊膜的柔软性都是重要的特性。因为具有高柔软性，羊膜可无间隙地被覆患处，并且也可以与患处良好的粘附并成活，发挥出良好的治疗效果。另一方面，作为细胞培养用基质使用羊膜时，由于具有高柔软性因此可以在羊膜上进行良好的细胞增殖以及正常的组织化(分化)。

专利文献1：特开平5-56987号公报

专利文献2：国际公开第03/043542 A1号文本

专利文献3：国际公开第03/092762 A1号文本

专利文献4：国际公开第2004/078225 A1号文本

发明内容

羊膜是哺乳动物中覆盖子宫和胎盘最表层的膜，由分娩时获取。因此，并非能够经常得到新鲜状态的羊膜，如果考虑到今后的临床应用，期待着提供可以长时间保存并且操作性也优异的羊膜。因此，将采取的羊膜制成干燥状态，使保存性以及操作性提高。通过实施干燥处理羊膜的保存性等虽然显著提高了，但是发生结构蛋白质的变性等，结果是当回到湿润状态时柔软性大大地降低。如果柔软性降低，还发生不能无间隙地被覆患处的情况，对患处的粘附性、成活性也降低。另一方面，经干燥处理的羊膜，在其上的细胞增殖率降低、多层化也受阻、不发生正常的组织化(分化)。认为这是由于伴随着柔软性的降低，羊膜表面的平坦性大幅降低而引起的。

本发明是鉴于以上课题而完成的，其主要目的在于提供含有保存性以及操作性优异，并且使用时具有高柔软性的羊膜的片状组合物。

为了实现上述目的，本发明人等试着通过对羊膜实施修饰，来提高柔软性。结果发现了用作为二糖之一的海藻糖处理后的羊膜，即使随后实施干燥处理，在回到湿润状态时柔软性也恢复、其柔软性是与未处理的羊膜(未加工羊膜)同等的水平。总之，明确了海藻糖处理对提高羊膜的柔软性是有效的。

并且，看到了通过经由海藻糖处理，羊膜的透明度也提高了这个惊人的现象。由上述事实表明，在对透明性的要求尽可能高的用途(例如角膜再建)中使用时，将羊膜进行海藻糖处理是极其有效的。

另一方面，通过海藻糖处理能够获得羊膜的拉伸强度也提高、比未加工羊膜还强韧的羊膜。由上述事实弄清了海藻糖处理对于羊膜操作性的提高、移植后的形态保持也是有效的。

此外，在验证海藻糖处理后的羊膜的活体适合性时，看到与未加工羊膜同样的高活体适合性。由此，确认了海藻糖处理对于活体适合性没有影响。

得到以上见解后，检查海藻糖对羊膜在作为细胞培养基质时的功能所带来的影响。具体而言，在海藻糖处理后的羊膜上培养角膜上皮细胞，检查细胞增殖率、多层化的程度。其结果是看到了良好的细胞增殖，并且发生了5～7层的多层化。这比未实施海藻糖处理的羊膜上的多层化(1～2层)的程度大幅提高。如此，表明羊膜在作为细胞培养基质使用时，海藻糖处理也是有效的。

接着，将在羊膜上形成有细胞层的片移植到动物眼表面，验证其再建效果。其结果是，显示出良好的粘附性和成活性，能够无缺损地再建眼表面，并维持高透明性。

本发明主要基于以上见解，提供以下的片状组合物。

[1]一种片状组合物，具备附加了海藻糖的羊膜而成。

[2]根据[1]所述的片状组合物，是冻结状态或者干燥状态。

[3]根据[2]所述的片状组合物，是冻干状态。

[4]根据[1]～[3]中任一项所述的片状组合物，所述羊膜是去除了上皮细胞层的羊膜。

[5]根据[1]～[4]中任一项所述的片状组合物，检测出所述羊膜的作为基底膜成分的胶原IV、胶原VII、层粘连蛋白5与未处理的羊膜为同等强度。

[6]根据[1]～[5]中任一项所述的片状组合物，所述羊膜是人羊膜。

[7]根据[1]～[6]中任一项所述的片状组合物，在所述羊膜上形成含有活体来源的细胞的细胞层。

[8]根据[7]所述的片状组合物，在所述细胞层中所述活体来源的细胞是多层化的。