[发明专利]抗凝剂及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及血液学领域且尤其涉及止血的分科领域。更具体来说，本发明涉及：1)抑制哺乳动物血液凝固的药剂，以及这些药剂在治疗和预防诸如中风、心肌梗塞以及深部静脉血栓形成的疾病中的应用；2)在如下临床情况下(诸如血栓形成、血栓性栓子以及不稳定的斑块等)能诊断和鉴定活化血小板的探针。

背景技术

血管损伤后机体控制血流的能力对延续生存至关重要。血液凝固的过程以及受损组织修复后随后的血凝块溶解被称为止血。止血由血管整体性丧失后的一系列按固定顺序发生的事件组成。

这个过程的起始阶段是血管的缩窄，由此限制了损伤部位的血液流动。下一步，血小板经凝血酶活化并聚集在损伤部位，形成一个暂时的、疏松的血小板栓子。纤维蛋白原主要负责刺激血小板的聚集成块。血小板通过与血管内皮内层破裂后暴露出的胶原结合而聚集成块。在活化过程中，血小板释放5′-二磷酸腺苷(ADP)和TXA2(活化更多的血小板)，5-羟色胺，磷脂，脂蛋白以及其他对于凝固级联反应很重要的蛋白质。除了诱发分泌，活化的血小板还改变其形状以适应栓子的形成。

为确保初步形成的疏松血小板栓子的稳定性，会形成一纤维蛋白网(也称作血凝块)并把栓子网住。最后，血凝块必须被溶解使正常血流在组织修复后再流通。血凝块的溶解通过纤维蛋白酶的作用而发生。

两条途径引起纤维蛋白凝块的形成：内源性途径和外源性途径。虽然这两条途径是通过截然不同的两种机制启动的，但它们都会会聚到一条共同的通路通向引起凝块形成。在组织无损伤的情况下对异常血管壁反应而形成的红色血栓或凝块是内源性途径的结果。而对组织损伤反应形成的纤维蛋白凝块则是外源性途径的结果。以上两种途径均很复杂，且均涉及众多不同的称为凝血因子的蛋白质。

血小板活化和血管假性血友病因子(von Willebrand factor，vWF)

止血如要发生，则血小板必须粘附到暴露的胶原上，释放其颗粒的内容物，并发生聚集。血小板粘附到内皮细胞表面暴露的胶原是通过血管假性血友病因子(vWF)介导的。vWF的功能是在血小板表面的一个特异糖蛋白(GPIb/IX)和胶原纤维之间搭起一座桥梁。除了在血小板和内皮细胞表面上暴露的胶原之间作为桥梁的作用以外，vWF结合到凝血因子VIII并使其稳定。凝血因子VIII和vWF的结合对于凝血因子VIII在血液循环中的正常生存是必需的。

vWF是一种复杂的多聚糖蛋白，其产生并存储在血小板内。vWF还能被巨核细胞合成，而且还发现vWF与内皮下结缔组织有关。血小板的活化最初是由凝血酶与血小板表面特异性受体结合而诱导的，从而启动信号转导级联反应。凝血酶受体偶联在一个G-蛋白上，而G-蛋白反过来激活磷脂酶C-γ(PLC-γ)。PLC-γ水解磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸(PIP2)，导致肌醇三磷酸(IP3)和甘油二酯(DAG)生成。IP3再诱导细胞内储库的Ca²⁺释放，DAG则激活蛋白激酶C(PKC)。

血小板粘附的胶原以及细胞内Ca²⁺的释放导致磷脂酶A2(PLA2)活化，然后水解膜磷脂，从而使花生四烯酸释放。花生四烯酸的释放引起血栓烷A2(TXA2)的生成增加及其随后的释放。这是另一种通过PLC-γ途径的血小板活化剂。另一种被胞内Ca²⁺储库释放激活的酶是肌球蛋白轻链激酶(MLCK)。活化的MLCK使肌球蛋白轻链磷酸化，磷酸化的肌球蛋白轻链与肌动蛋白作用，导致血小板形态和运动力发生变化。

PKC的众多效应之一是一个特异的47,000-道尔顿血小板蛋白的磷酸化和活化。该活化蛋白诱导血小板颗粒内容物释放；其中之一就是ADP。ADP进一步刺激血小板增强总的活化级联反应；其也能改变血小板膜，使纤维蛋白原粘附到血小板表面，引发纤维蛋白原诱导的血小板聚集。

血小板的活化对于血小板聚集形成血小板栓是必需的。然而活化血小板表面磷脂在凝血级联反应活化过程中的作用同样重要。

当血液和暴露的内皮细胞表面接触以后，内源性凝血机制启动。外源性途径和内源性途径的交汇点在因子X活化为因子Xa。因子Xa有一种功能是将因子VII进一步活化为VIIa。活性因子Xa也能水解并活化凝血酶原变成凝血酶。然后，凝血酶激活因子XI、VIII和V，进一步推进级联反应。最终凝血酶将纤维蛋白原转化为纤维蛋白，并激活因子XIII成为XIIIa。因子XIIIa(又称谷氨酰胺转移酶)交联纤维蛋白聚合物使血凝块固化。