[发明专利]使用来自脐带血的基质细胞将来自脐带血的有核细胞增量(expanding)及移植(engrafting)的方法

权利要求书

1.一种用于培养来自脐带血(UCB)的有核细胞的方法，其包括：

制备包括该有核细胞与来自脐带血的黏附性基质细胞的共培养，其中该有核细胞与该黏附性基质细胞是各别加入该共培养中。

2.如权利要求1所述的方法，其中该有核细胞包括未成熟或成熟细胞。

3.如权利要求2所述的方法，其中该未成熟细胞包括祖细胞。

4.如权利要求2所述的方法，其中该成熟细胞选自粒细胞、嗜中性白细胞、巨核细胞、巨噬细胞、T细胞、自然杀伤细胞以及红细胞。

5.如权利要求1所述的方法，其中该有核细胞选自CD34^-细胞、CD34⁺细胞或Lin^-细胞。

6.如权利要求1所述的方法，其中该黏附性基质细胞包括间充质干细胞。

7.如权利要求1所述的方法，其中该方法产生相较于没有该黏附性基质细胞的有核细胞的培养所出现的有核细胞的数目而言较大数目的有核细胞。

8.如权利要求6所述的方法，其中该间充质干细胞是非限制性体干细胞(USSCs)。

9.如权利要求8所述的方法，其中该非限制性体干细胞特征为CD13⁺、CD29⁺、CD90⁺、CD105⁺、CD166⁺、SH2⁺、SH3⁺、SH4⁺、CD45^-、CD34^-以及CD14^-。

10.如权利要求9所述的方法，其中该非限制性体干细胞进一步具有表达细胞外基质蛋白，且缺乏表达透明质酸合成酶与纤维调节素的特征。

11.如权利要求1所述的方法，其中该有核细胞或是该黏附性基质细胞是从脐带血中分离取得或是由从脐带血中分离取得的细胞衍生而来。

12.如权利要求1所述的方法，其中于该培养前，该有核细胞或是该黏附性基质细胞是实质上从其它细胞种类中分离出。

13.如权利要求3所述的方法，其中该祖细胞为造血干细胞。

14.如权利要求13所述的方法，其中该造血干细胞包括至少40％的该祖细胞。

15.如权利要求13所述的方法，其中该祖细胞包括CD34^-且Lin^-细胞。

16.如权利要求15所述的方法，其中该CD34⁺且Lin^-细胞包括至少40％的该祖细胞。

17.如权利要求1所述的方法，其中该有核细胞或该黏附性基质细胞为人类细胞。

18.如权利要求1所述的方法，其中相较于没有与黏附性基质细胞一起培养至少一天的有核细胞的增量，当该黏附性基质细胞与该有核细胞一起培养至少一天，该共培养增加该有核细胞的增量为2倍。

19.如权利要求18所述的方法，其中该共培养增加该有核细胞的增量为10倍。

20.如权利要求19所述的方法，其中该共培养增加该有核细胞的增量为100倍。

21.如权利要求20所述的方法，其中该共培养增加该有核细胞的增量为1000倍。

22.如权利要求21所述的方法，其中该共培养增加该有核细胞的增量为1,000,000倍。

23.如权利要求3所述的方法，其中于该共培养后，转移该祖细胞至另外的培养基中，并于产生分化成为预先决定细胞种类的条件下培养。

24.如权利要求1所述的方法，其中是于该共培养前增量该黏附性基质细胞。

25.如权利要求1所述的方法，其中可于该共培养前增量该有核细胞。

26.如权利要求1所述的方法，其中该培养是发生于至少一种细胞因子存在下。