[发明专利]用于同时检测并鉴定不同类型的抗生素的体外方法以及相应的检定试剂盒

权利要求书

1.同时测量不同类型的抗生素的检定试剂盒，所述不同类型的抗生素至少为β-内酰胺类和四环素类，其特征在于，所述检定试剂盒包括：

-一方面，单一的反应混合物，所述反应混合物至少包含特异性识别β-内酰胺类的第一种受体、以特异性和竞争性的方式识别四环素和生物素化的核酸片段的第二种受体，这两种受体优选用胶体金颗粒直接地或者借助于抗体或与蛋白A相联合的抗体间接地进行标记；

-和另一方面，固体支持物形式的回收系统，所述回收系统包括硝化纤维素膜，在该硝化纤维素膜上，在两个已知且不同的、称为测试区带的地方分别固着有具有β-内酰胺核的抗生素和抗生物素蛋白，或者相反；

从而使得在所述两个测试区带处在该回收系统上检测到的标记强度独立地由于每种抗生素被其经标记的受体竞争性地识别而产生。

2.根据权利要求1的检定试剂盒，其特征在于，固着在硝化纤维素膜上的具有β-内酰胺核的抗生素和抗生物素蛋白分别是青霉素或头孢菌素，优选固定在β-乳球蛋白上的氨苄青霉素，和卵抗生物素蛋白。

3.同时测量不同类型的抗生素的检定试剂盒，所述不同类型的抗生素至少为β-内酰胺类和磺酰胺类，其特征在于，所述检定试剂盒包括：

-一方面，单一的反应混合物，所述反应混合物至少包含特异性识别β-内酰胺类并直接或间接地优选用胶体金颗粒标记的第一种受体、生物素化的抗磺酰胺抗体和直接或间接用胶体金标记的磺酰胺类似物；

-和另一方面，固体支持物形式的回收系统，所述回收系统包括硝化纤维素膜，在该硝化纤维素膜上，在两个已知且不同的、称为测试区带的地方分别固着有具有β-内酰胺核的抗生素和抗生物素蛋白，或者相反；

从而使得在所述两个测试区带处在该回收系统上检测到的标记强度独立地由于每种抗生素的竞争性识别而产生。

4.用于同时测量相应于不同类型的抗生素的分析物的检定试剂盒，所述不同类型的抗生素至少为四环素类和磺酰胺类，其特征在于，所述检定试剂盒包括：

-一方面，单一的反应混合物，所述反应混合物包含至少一种以特异性和竞争性的方式识别四环素和生物素化的核酸片段的受体，所述受体优选用胶体金颗粒直接地或借助于抗体间接地进行标记，以及抗磺酰胺抗体和直接或间接地优选用胶体金标记的磺酰胺类似物；

-和另一方面，固体支持物形式的回收系统，所述回收系统包括硝化纤维素膜，在该硝化纤维素膜上，在两个已知且不同的、称为测试区带的地方分别固着有特异性地针对四环素受体或针对四环素受体的特异性抗体的抗体和特异性地针对抗磺酰胺抗体的抗体，或者相反。

5.根据权利要求1-4中任一项的检定试剂盒，其特征在于，加至反应混合物中的特异性抗-受体抗体是单克隆或多克隆的抗体，其经化学或重组修饰或者未经化学或重组修饰，经纯化或未经纯化，直接或间接地与标记颗粒优选胶体金颗粒相偶联或未相偶联。

6.根据权利要求1-5中任一项的检定试剂盒，其特征在于，置于浸渍片支持物上的硝化纤维素膜在第一端与膜接触，而在第二端与吸水纸接触，并且该硝化纤维素膜在液体的迁移方向上接连地具有所述两个不同的测试区带，一个能够可选地将所述两个测试区带分开的对照区带。

7.根据权利要求6的检定试剂盒，其特征在于，所述对照区带从优选地用胶体金颗粒标记的蛋白质的任何制剂获得，并且更加优选地从与胶体金颗粒相偶联的牛血清白蛋白或BSA获得。

8.根据权利要求1或2的用于同时测量β-内酰胺类、四环素类和磺酰胺类的检定试剂盒，其特征在于，所述反应混合物还包含特异性识别磺酰胺类并优选地直接或间接用胶体金颗粒标记的抗体，以及所述回收系统还包括固定在硝化纤维素膜上的与磺酰胺类相缀合的蛋白质制剂。

9.根据权利要求8的用于同时测量β-内酰胺类、四环素类和磺酰胺类的检定试剂盒，其特征在于，置于浸渍片支持物上的硝化纤维素膜在第一端与膜接触，而在第二端与吸水纸接触，并且该硝化纤维素膜在液体的迁移方向上具有接连地相继布置的三个不同测试区带和一个对照区带，或者两个对照区带，每个备选地置于两条测试区带之间。