[发明专利]通过在释放胞内酶前灭活胞外酶来鉴别样品中的细胞

权利要求书

1.一种检测液体样品中关注的细胞存在与否的方法，其中：

(a)样品：(i)包括胞外介质，所述介质包含具有可测活性的酶；和(ii)被怀疑包含关注的细胞，所述细胞包含具有所述可测活性的胞内酶；

(b)所述方法包括以下步骤：(i)用一种试剂处理液体样品，所述试剂能够灭活胞外介质中的所述可测活性，但不灭活所述关注细胞中的可测活性；(ii)裂解所述关注的细胞释放胞内酶；和(iii)检测所述可测活性。

2.权利要求1所述的方法，其中关注的细胞是微生物细胞。

3.权利要求2所述的方法，其中关注的细胞是细菌细胞。

4.上述权利要求中任意一项所述的方法，其中液体样品是血液样品。

5.权利要求4所述的方法，其中血液样品是其中血细胞已经被裂解而微生物细胞保存完整的血液样品。

6.上述权利要求中任意一项所述的方法，其中可测的酶活性是腺苷酸激酶活性。

7.权利要求6所述的方法，其中腺苷酸激酶活性是ATP产量，并通过荧光素酶/荧光素反应检测。

8.上述权利要求中任意一项所述的方法，其中试剂是蛋白酶。

9.权利要求8所述的方法，其中蛋白酶是胰蛋白酶。

10.一种试剂盒，包括蛋白酶，和下列试剂中的至少一种：ADP；可溶性镁盐；可溶性锌盐；荧光素酶；荧光素；皂角苷；和/或消泡剂，例如聚丙二醇。

11.一种包括裂解试剂和蛋白酶的反应容器。所述容器通常是一次性的管，并且适合于接收血液样品进行一步法血液裂解和腺苷酸激酶灭活步骤。