[发明专利]在包含植物蛋白水解产物的无血清细胞培养液中生产多肽

权利要求书

1.用于在包含在无血清培养液中的真核细胞中大规模生产多肽的方法，所述方法包括

(i)所述细胞的繁殖阶段，其中使所述细胞在第一种细胞培养液中繁殖，和

(ii)所述细胞的生产阶段，其中所述细胞存在于第二种细胞培养液中，

其中所述细胞培养液各自包含植物蛋白水解产物，并且其中第一种细胞培养液中植物蛋白水解产物的浓度C₁和第二种细胞培养液中植物蛋白水解产物的浓度C₂之比，即C₁∶C₂，为1.5∶1-10∶1，

并且其中所述浓度C₂为0.2-3.5g/L，和所述浓度C₁为4.0-10.0g/L。

2.根据权利要求1的方法，其中所述比例C₁∶C₂为2∶1-10∶1。

3.根据权利要求2的方法，其中所述比例C₁∶C₂为2.5∶1-8∶1。

4.根据权利要求3的方法，其中所述比例C₁∶C₂为3∶1-6∶1。

5.根据权利要求1-4中任一项的方法，其中所述植物蛋白水解产物是大豆蛋白水解产物。

6.根据权利要求1-4中任一项的方法，其中所述浓度C₂为0.9-2.5g/L。

7.根据权利要求1-4中任一项的方法，其中所述多肽是凝血因子VII多肽。

8.根据权利要求1的方法，其中所述比例C₁∶C₂为2.5∶1-8∶1，所述植物蛋白水解产物是大豆蛋白水解产物，所述浓度C₂为0.9-2.5g/L，并且所述多肽是凝血因子VII多肽。

9.根据权利要求1-4中任一项的方法，其中所述植物蛋白水解产物的浓度具有下列特性：

在所述繁殖阶段中的高浓度，即C₁；

在所述生产阶段中的低浓度-低水平A，即C_2A；和

在所述生产阶段中的低浓度-低水平B，即C_2B；

其中C₁＞＞C_2B＞C_2A，并且浓度C_2A和C_2B在对于C₂而指定的浓度范围内，并且其中当观察到细胞数目减少时，进行从低水平A即C_2A至低水平B即C_2B的首次转换，和当细胞数目已恢复至大约相应于减少前水平的水平时，进行从低水平B即C_2B至低水平A即C_2A的后续转换。

10.根据权利要求5的方法，其中所述植物蛋白水解产物的浓度具有下列特性：

在所述繁殖阶段中的高浓度，即C₁；

在所述生产阶段中的低浓度-低水平A，即C_2A；和

在所述生产阶段中的低浓度-低水平B，即C_2B；

其中C₁＞＞C_2B＞C_2A，并且浓度C_2A和C_2B在对于C₂而指定的浓度范围内，并且其中当观察到细胞数目减少时，进行从低水平A即C_2A至低水平B即C_2B的首次转换，和当细胞数目已恢复至大约相应于减少前水平的水平时，进行从低水平B即C_2B至低水平A即C_2A的后续转换。