[发明专利]一种纤溶酶及其培制方法

权利要求书

1.一种纤溶酶，以保藏号为CGMCC No.1836的好食脉孢霉(N.sitophila)菌株17号为菌种，经培养发酵、分离和提纯制成，该纤溶酶由两个亚基组成，相对分子量分别为30000和15500，等电点为7.9±0.2。

2.一种如权利要求1所述的纤溶酶的培制方法，包括以下步骤：以好食脉孢霉(N.sitophila)菌株17号为菌种，经过斜面培养、固体发酵培养生产纤溶酶，从发酵产物中分离纯化纤溶酶。

3.如权利要求2所述的纤溶酶的培制方法：斜面保存采用葡萄糖琼脂培养基，28～30℃培养4天，发酵培养基含豆渣、麸皮和无机盐，28～30℃培养48小时，用生理盐水对固体发酵产物浸提6小时，经纱布过滤得到过滤液。

4.如权利要求3所述的纤溶酶的培制方法：将所得到的过滤液经过40～80％饱和度硫酸铵分级盐析，离心除去杂质，得到粗酶液：采用现代色谱技术纯化纤溶酶。

5.如权利要求4所述纤溶酶的培制方法：其粗酶液纯化的具体方法如下：

a、Octyl-Sepharose Fast Flow疏水相互作用层析：将样品盐饱和度调到40％，上样后用40％～0硫酸铵溶液梯度洗脱，收集有纤溶活性组分；

b、Sephadex G-25凝胶过滤层析：用pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，收集有纤溶活性组分；

c、SP-Sephar离子交换层析：样品脱盐后上样，用0～0.8mol/L的NaCl缓冲溶液梯洗，收集有纤溶活性组分；

d、Sephadex 75凝胶过滤层析：用pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，收集有纤溶活性组分。