[发明专利]羟基红花黄色素A及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种羟基红花黄色素A，其特征在于该羟基红花黄色素A用下述方法制备：

1)提取：取红花药材，加12倍量水80℃下提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓缩至60℃下相对密度为1.10-1.14，静置24小时离心分取上清液；

2)分离：取上清液柱层析，上清液体积与柱床体积之比为1∶8-12，柱床径高比为1∶7-13，用水以18-22ml/min的流速洗脱至洗脱液Molisch反应及茚三酮反应呈阴性，再用5个柱床体积的5％乙醇溶液以18-22ml/min的流速洗脱，收集5％乙醇洗脱溶液，浓缩至50℃下相对密度为1.2，得浓缩液A；

3)纯化：取浓缩液A柱层析，浓缩液体积与柱床体积之比为1∶18-22，柱床径高比为1∶9-15，用水以8-12ml/min的流速洗脱，收集黄色素色带，浓缩至50℃下相对密度为1.2，得浓缩液B；

4)再纯化：取浓缩液B按步骤3)所述工艺，以水为洗脱液反复纯化3次，得浓缩液C；

5)除菌、喷雾干燥：将浓缩液C用垂融玻璃G5初滤后，再采用0.2μm微孔滤膜滤过除菌，然后立即喷雾干燥，出口温度80℃，得羟基红花黄色素A干粉。

2.一种羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于该方法包括下述顺序的步骤：

1)提取：取红花药材，加12倍量水80℃下提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓缩至60℃下相对密度为1.10-1.14，静置24小时后离心分取上清液；

2)分离：取上清液柱层析，上清液体积与柱床体积之比为1∶8-12，柱床径高比为1∶7-13，用水以18-22ml/min的流速洗脱至洗脱液Molisch反应及茚三酮反应呈阴性，再用5个柱床体积的5％乙醇溶液以18-22ml/min的流速洗脱，收集5％乙醇洗脱溶液，浓缩至50℃下相对密度为1.2，得浓缩液A；

3)纯化：取浓缩液A柱层析，浓缩液体积与柱床体积之比为1∶18-22，柱床径高比为1∶9-15，用水以8-12ml/min的流速洗脱，收集黄色素色带，浓缩至50℃下相对密度为1.2，得浓缩液B；

4)再纯化：取浓缩液B按步骤3)所述工艺，以水为洗脱液反复纯化3次，得浓缩液C；

5)除菌、喷雾干燥：将浓缩液C用垂融玻璃G5初滤后，再采用0.2μm微孔滤膜滤过除菌，然后立即喷雾干燥，出口温度80℃，得羟基红花黄色素A干粉。

3.根据权利要求2所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于：

步骤2)中所述的上清液体积与柱床体积之比为1∶10，所述的柱床径高比为1∶9-11；

步骤3)中所述的浓缩液体积与柱床体积之比为1∶20，所述的柱床径高比为1∶11-13。

4.根据权利要求3所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于：步骤2)中所述的柱床径高比为1∶10，步骤3)中所述的柱床径高比为1∶12。

5.根据权利要求2所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于：所述的柱层析为应用大孔树脂柱和/或葡聚糖凝胶柱进行柱层析。

6.根据权利要求5所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于：步骤2)中所述的柱层析为使用大孔树脂柱进行柱层析，步骤3)中所述的柱层析为使用葡聚糖凝胶柱进行柱层析。

7.根据权利要求6所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于：所述的大孔树脂柱为非极性大孔树脂柱。

8.根据权利要求7所述的羟基红花黄色素的制备方法，其特征在于：所述的非极性大孔树脂柱为D101非极性大孔树脂柱。

9.权利要求1所述的羟基红花黄色素A在制备预防及治疗涉及脑血管疾病的药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的羟基红花黄色素A，其特征在于：药物可制成冻干粉针剂、胶囊剂、片剂或注射液。