[发明专利]高杀菌活力T4溶菌酶在酵母中的表达及生产方法

权利要求书

1.一种通过重组酵母表达和生产具高杀菌活力T4溶菌酶的方法。

2.如权利要求1中的方法，其中所说的T4溶菌酶具有序列表中的1所示的氨基酸序列，而该重组蛋白比T4噬菌体所编码的T4溶菌酶天然蛋白具有更高的杀菌活性，若作为添加剂可广泛地应用在医药、食品、农业和化妆品等行业。

3.如权利要求1中的方法，编码高杀菌活力T4溶菌酶的DNA序列，其特征在于编码或至少部分编码如序列表1中所示的氨基酸序列。

4.如权利要求3中的所述的DNA序列，其特征在于具有或至少部分具有序列表中的2所示的核苷酸序列。

5.如权利要求1中的方法，需构建一种表达质粒载体，其特征在于它含有权利要求3中所述的编码高杀菌活力T4溶菌酶的DNA序列。

6.如权利5中所述的表达载体，它是指pPIC9K或其他能够诱导表达并分泌重组蛋白到胞外的质粒载体。

7.如权利要求1中的方法，需要一种酵母宿主细胞，其特征在于它包含权利要求5中所述的表达载体。

8.如权利要求7中所述的宿主细胞，它是指毕赤酵母菌株GS115或其他能够表达外源基因的酵母菌株。

9.如权利要求1中的方法，一种利用毕赤酵母GS115高效表达和生产如权利要求1中所述的T4溶菌酶的方法，其中包括了以下四个阶段：

a：菌体培养

b：饲喂碳源

c：诱导表达

d：蛋白纯化

10.如权利要求1中的方法，其中所述的高杀菌活力T4溶菌酶经部分纯化或完全纯化后，若作为添加剂可广泛地应用在医药、食品、农业和化妆品等行业。