[发明专利]脑血管内皮细胞靶向性聚乳酸纳米粒载体及其制法和应用

权利要求书

1.一种能承载治疗性基因片段并能将其定向导入到脑血管内皮细胞的载体，其特征在于，它是按以下方法制备的聚乳酸纳米粒BNPs：

用乙腈溶解PLA，所得溶液缓慢加入50％(v/v)的乙醇水溶液中，随后，将所制得的混悬液边振荡边加入到蒸馏水中，再用旋转蒸发器去除有机溶剂和部分水，制得聚乳酸纳米粒BNPs悬浮液。

2.一种荧光标记PLA纳米粒FNPs的制备方法，其特征在于，将FITC-Dextran(FITC-D)加入到权利要求1的说述的聚乳酸纳米粒BNPs悬浮液中，使得聚乳酸纳米粒与FITC-Dextran的重量比为10∶1，静置24小时，制得荧光标记PLA纳米粒FNPs悬浮液。

3.T-80修饰的PLA纳米粒的制备方法，其特征在于，在依权利要求2所述方法制得的FNPs悬浮液中加入T-80，静置24小时，使PLA纳米粒与FITC-D和T-80之间的重量比为10∶1∶10(w/w)，即制得T-80修饰的荧光标记PLA纳米粒悬浮液。

4.权利要求1所述的能承载治疗性基因片段并能将其定向导入到脑血管内皮细胞的载体在制备用于防治脑血栓药物中的应用。

5.一种能承载治疗性基因片段并能将其定向导入到脑血管内皮细胞的载体的制备方法，其特征在于，用乙腈溶解PLA，所得溶液缓慢加入50％(v/v)的乙醇水溶液中，随后，将所制得的混悬液边振荡边加入到蒸馏水中，再用旋转蒸发器去除有机溶剂和部分水，制得聚乳酸纳米粒BNPs悬浮液。

6.制备载NF-κB decoy寡核苷酸片段oligonucleotides，ODNs的PLA纳米粒的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)取适量NF-κB decoy ODNs水溶液，按与碱基1∶1的摩尔比，逐滴加入7.5％(wt/V)CTAB，得到的白色絮凝物经高速离心、冷冻干燥，制得ODNs-CTAB复合物；

(2)将ODNs-CTAB复合物溶于二甲亚砜，随后溶入PLA，使得PLA∶ODNs为100∶1(质量比)；随后磁力搅拌的条件下，逐滴加入含0.5～2.5％(wt/V)的聚乙烯醇(PVA)水溶液中，其中二甲亚砜溶液和PVA水溶液的比例为1∶4～1∶6.6(V/V)，再经高速离心处理三次去除二甲亚砜和PVA，加入适量蒸馏水，即制得载NF-κB decoy ODNs纳米粒(以下简称ODNs-纳米粒)悬浮液；

(3)ODNs-纳米粒悬浮液经高速离心、冷冻干燥后得到ODNs-纳米粒干粉，保存于-70℃。

7.载NF-κB decoy寡核苷酸片段oligonucleotides，ODNs的PLA纳米粒在制备用于预防脑血栓形成的药物中的应用。