[发明专利]一种丙酮酸氧化酶基因、其重组表达质粒及转化的菌株无效
申请号: | 200610118269.5 | 申请日: | 2006-11-10 |
公开(公告)号: | CN101177686A | 公开(公告)日: | 2008-05-14 |
发明(设计)人: | 赵辅昆;陶家权;庄英萍;储炬;袁中一 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人: | 缪利明 |
地址: | 200031*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丙酮酸 氧化酶 基因 重组 表达 质粒 转化 菌株 | ||
1.一种丙酮酸氧化酶基因AvPyOD,其特征在于,该基因具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的丙酮酸氧化酶基因AvPyOD,其特征在于,该基因来源于绿色气球菌ATCC10400。
3.如权利要求1或2所述的丙酮酸氧化酶基因AvPyOD,其特征在于,所述基因还含有对应9个氨基酸残基MGMHHHHHH的核苷酸序列。
4.如利要求1~3中任一项所述的丙酮酸氧化酶基因AvPyOD所编码的氨基酸序列。
5.如权利要求4所述的氨基酸序列,其特征在于,该氨基酸序列带有9个氨基酸残基MGMHHHHHH的纯化标签。
6.一种重组表达质粒pSMLPyOD,其特征在于,该重组表达质粒克隆有权利要求1~3中任一项所述的丙酮酸氧化酶基因AvPyOD。
7.如权利要求6所述的重组表达质粒,其特征在于,该重组表达质粒是将丙酮酸氧化酶基因AvPyOD与质粒pSML104相连接而获得。
8.如权利要求7所述的重组表达质粒,其特征在于,所述质粒pSML104以trc为启动子,带有自身表达元件,转录终止子为rrnb,复制子为p15a,并且含有四环素抗性基因。
9.如权利要求6~8中任一项所述的重组表达质粒,其特征在于,所述重组表达质粒还带有对应9个氨基酸残基MGMHHHHHH的核苷酸序列。
10.一种大肠杆菌基因工程菌株DH5α/pSMLPyOD,其特征在于,该菌株转化有权利要求6~9中任一项所述的重组表达质粒。
11.如权利要求10所述的基因工程菌株DH5α/pSMLPyOD,其特征在于,其保藏号为CGMCC No.1856。
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