[发明专利]突变青霉素G酰化酶、其重组表达质粒及转化的工程菌株

权利要求书

1.一种青霉素G酰化酶的突变DNA序列，其特征在于，其表达蛋白的氨基酸序列与巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶的氨基酸序列相比，在位点α144上的酪氨酸被精氨酸替代，或位点α145上的苯丙氨酸被丙氨酸、亮氨酸或酪氨酸替代，或位点β24上的缬氨酸被苯丙氨酸替代或以上这些突变位点的组合，以及这些突变位点与其它无义突变或同义突变的组合。

2.如权利要求1所述的突变DNA序列，其特征在于，其表达蛋白的氨基酸序列与巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶的氨基酸序列相比，在位点α144上的酪氨酸被精氨酸替代，同时在位点β24上的缬氨酸被苯丙氨酸替代。

3.如权利要求1或2所述的DNA序列，其特征在于，该序列是通过对巨大芽孢杆菌来源的PGA的DNA序列进行定点突变而获得的。

4.一种突变质粒，其特征在于，该突变质粒含有如权利要求1-3中任一项所述的基因序列。

5.如权利要求4所述的突变质粒，其特征在于，该突变质粒还含有氨苄霉素抗性基因。

6.一种具有青霉素G酰化酶合成性能的工程菌，其特征在于，该工程菌转化有权利要求4或5所述的突变质粒。

7.如权利要求6所述的工程菌，其特征在于，该工程菌为枯草杆菌。

8.如权利要求7所述的工程菌，其特征在于，该工程菌为枯草杆菌WB600。

9.一种权利要求1-3中任一项所述的突变DNA序列所表达的青霉素G酰化酶突变酶。

10.如权利要求9所述的突变酶，其特征在于，该酶由权利要求6-8任一项所述的工程菌经发酵而获得。