[发明专利]一种快速检测结核分支杆菌多重耐药性的试剂盒

权利要求书

1.一种快速检测结核分支杆菌多重耐药性的试剂盒，其特征是包括同时扩增4种结核耐药相关基因的多重PCR体系和同时检测所述耐药相关基因中相应点突变的探针杂交体系。

2.按权利要求1所述的快速检测结核分支杆菌多重耐药性的试剂盒，其特征是所述的4种结核耐药相关基因是KatG、embB、rpsL和rpoB耐药基因。

3.权利要求1的快速检测结核分支杆菌多重耐药性的试剂盒的制备方法，其特征是联合应用多重PCR技术和及核酸杂交技术，检测结核耐药相关基因突变，包括下述步骤：

(1)采用多重PCR技术，设计4对特异性的结核分支杆菌耐药基因扩增引物，用常规PCR体系进行梯度PCR反应，扩增相应的4个靶基因；

(2)采用核酸杂交技术检测结核分支杆菌耐药基因点突变情况。

4.按权利要求3所述的方法，其中所述的结核分支杆菌耐药基因扩增引物其序列及扩增产物耐药基因包含的易突变位点如表1所示，其中，所有反向引物均以生物素标记，

表1

  引物名称  引物长度  引物序列(5’-3’)  扩增耐  药基因  产物长度  包含的易突变位点  KatG-F  25base  TTATGCTTGGGCTGGAAGAGCTCGT  KatG  139bp  315  KatG-R*  25base  GGCACTCGTAGCCGTACAGGATCTC  embB-F  25base  TATGATATTCGGCTTCCTGCTCTGG  embB  162bp  306  embB-R*  25base  GCATTGTAATACCAGCCGAAGGGAT  rpsL-F  25base  ATACCGCGTGTACACCACCACTCCG  rpsL  190bp  43  rpsL-R*  25base  TTACTTGTAGCGCACACCAGGCAGG  rpoB-F  20base  ATCAACATCCGGCCGGTGGT  rpoB  213bp  511、513、516、518、  522、526、531、533  rpoB-R*  20base  GGTTTCGATCGGGCACATCC

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