[发明专利]一种采用酶法拆分制备L－酪氨酸－15N的方法

权利要求书

1.一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，该方法步骤如下：

(1)酶反应底物的配制：取一定量的N-三氟乙酰-DL-酪氨酸-¹⁵N，用磷酸盐缓冲溶液溶解后，调节溶液的pH值为4.5～8.0，定容使溶液的浓度为0.01～0.50mol/L作为酶反应底物；

(2)保温反应：按照每克底物加入1～10g游离米曲霉菌体细胞或0.01～0.5g氨基酰化酶酶粉的比例将游离的米曲霉菌体细胞或氨基酰化酶酶粉加入(1)中配制好的酶反应底物中，在30～50℃、一定的摇床转速下，保温反应10～50小时；

(3)萃取：保温反应结束后反应液用盐酸调pH至1～3，用等体积的乙酸乙酯错流萃取1～4次；

(4)脱色：萃取后的水相经减压浓缩至一定体积，加入适量的活性炭脱色；

(5)脱色液浓缩至一定体积后，用稀盐酸和稀NaOH调pH至等电点，在0～4℃下过夜，再用冰水洗去杂质，过滤后烘干即得L-酪氨酸-¹⁵N产品。

2.根据权利要求1所述的一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，所述的底物浓度为0.02～0.30mol/L较佳。

3.根据权利要求1所述的一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，所述的底物pH为5.0～7.0之间较佳。

4.根据权利要求1所述的一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，所述的游离米曲霉菌体细胞的加入量为每克底物1～8g较佳。

5.根据权利要求1所述的一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，所述的氨基酰化酶酶粉的加入量为每克底物0.03～0.2g较佳。

6.根据权利要求1所述的一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，所述的调节溶液的pH值采用稀NaOH、LiOH、氨水中一种与盐酸或醋酸调节。

7.根据权利要求1所述的一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，所述的保温反应温度为30～40℃较佳，反应时间为10～40小时较佳。

8.根据权利要求1所述的一种采用酶法拆分制备L-酪氨酸-¹⁵N的方法，其特征在于，所述的保温反应的摇床为水浴摇床，该摇床转速为100～150转/min。