[发明专利]使用溶胶－凝胶基体的农药残留物快速活体鉴定

说明书

技术领域

本发明涉及一种包埋乙醯胆碱脢(Ache)的方法，步骤包括在水中从一氧化硅溶液中形成硅溶胶，调节所述乙醯胆碱脢(Ache)的酸碱度至低于7度以稳定所述硅溶胶，从而形成一种含有乙醯胆碱脢(Ache)的硅溶胶基体。本发明提供一种生物吸收介体的技术，其中的酵若储存在一个温度4℃、用完即弃、以异丁烯酸制成的比色杯内，可长期保持稳定性及活性。该技术提供一种在异丁烯酸的用完即弃比色杯中制备一用完即弃形的酵鉴定。所述包埋的酵证实可以与常用于蔬菜类对抗害虫的农药如有机磷酸盐、氨基甲酸盐类等作出反应。此溶胶-凝胶中的相互作用的作用方式为抑制活动；底物(ACTI)及硝基苯甲酸(DTNB)与所述酵的显色反应结果呈黄色，该颜色证明为在溶胶基体中形成，即在溶胶腔内形成，若轻微摇动含溶胶-凝胶的比色杯，所述颜色便释放到颜色肉眼可见的自由溶液，但若要准确量度抑制活动，则需要用量热分光测光仪量度形成颜色的吸光度，测试的计算基础为与一对照溶液，即一不含农药的溶液，作颜色转变百分差的比较。抑制百分率的限界值被设至最低，以决定样本中农药成分的可接受程度。

背景技术

本发明涉及一种用于包埋乙醯胆碱脢(Ache)的溶胶-凝胶方法，用于生物鉴定研究。改善生物鉴定效能的新物质近年不断发展，在这方面最具挑战性的发展之一是生物载体基体固定和集合生物分子于主基体内，以及保留所述生物分子的功能性。近年来，各种技术不断发展，如聚合物和无机基体的吸附、共价连接、封锁及包埋，以取得可再生及发达的固定技术来保存活体分子的活动。

由溶胶-凝胶法制成的硅主基体已出现并成为一个可靠的平台，来包埋生物分子如酵、抗体及细胞。硅主基体的包埋为酵提供一个较稳定的环境，因为聚合物架构在生物分子附近生长，形成一个隔离罩，从而防止酵的聚集和伸展。这些溶胶-凝胶基体属化学惰性、热稳定的、吸水及透明的，容许分光监察封锁的样本。溶胶-凝胶基体细孔里的微包埋不会降低生物分子的仿射性及活动，因为酵并不是真的附在基体上。本发明的目的是发展一种包埋溶胶-凝胶的家蝇乙醯胆碱脢，作为一种生物感应物质，可用于探测蔬菜里的农药残留物的活体鉴定。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种制造有细孔、透明、含有一包埋生物物质的溶胶-凝胶基体的方法。

本发明的另一目的在于提供一种用作定量或定性探测一种测试物质的方法，所述测试物质与一活性生物物质反应，或其反应由一活性生物物质催化，其特征在于：所述生物物质包埋于一溶胶-凝胶基体内，并所述溶胶-凝胶基体由非酒精方法制备。

本发明的再一目的在于提供一种储存一生物物质于一个有细孔的透明溶胶-凝胶基体内的方法，其特征在于：即使暴露于不利环境，所述物质的生物活性保持于约80％至少6个月。

为达致本发明的上述及其它目的，本发明提供：

一种制造有细孔、透明、含有一包埋生物物质的溶胶-凝胶基体的方法，包括以下步骤：

(i)在一含有水和一酸性催化剂的非酒精介体中混合一金属烷氧化合物，并搅拌混合物直至取得清液，以形成一单相溶胶；

(ii)加入一缓冲剂来提升步骤(i)所取得的混合物的酸碱度至5至7度；

(iii)加入一生物物质至步骤(ii)所得的缓冲溶胶中；

(iv)形成一溶胶-凝胶，并容许所述溶胶-凝胶时效成形；

(v)容许所述溶胶-凝胶中一部分水蒸发，令步骤(iv)的形成物的体积减少，并所述生物物质包埋在所述体积减少的溶胶-凝胶单块内。

一种用作定量或定性探测一种测试物质的方法，所述测试物质与一活性生物物质反应，或其反应由一活性生物物质催化，其特征在于：所述生物物质包埋于一溶胶-凝胶基体内，并所述溶胶-凝胶基体由非酒精方法制备。所述定量或定性探测方法包括以下步骤：

(i)制备所述溶胶-凝胶基体，其包括包埋于一有细孔、透明并由非酒精溶胶-凝胶方法制备的基体的所述活性生物物质；

(ii)令含溶胶-凝胶基体的所述生物物质与含有所测试物质的一气体或水溶液接触；

(iii)定量或定性探测、观察或量度包埋于所述溶胶-凝胶基体的所述生物物质的一个或多于一个特征的转变。

一种储存一生物物质于一个有细孔的透明溶胶-凝胶基体内的方法，其特征在于：即使暴露于不利环境，所述物质的生物活性保持于约80％至少6个月，包括以下步骤：

(i)在一含有水和一酸性催化剂的非酒精介体中混合一金属烷氧化合物，并搅拌混合物直至取得清液，以形成一单相溶胶；