[发明专利]生产植酸酶的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生产植酸酶的方法。 

背景技术

磷是动物机体必须的矿物元素，为了满足饲料业和养殖业的需求，消耗了大量昂贵的磷矿资源。只有很小部分磷沉积到体内和畜产品中，因而对环境，特别是集约化饲养时，对地下水和土壤的污染十分严重。 

随着生物技术的发展，人们发现植酸酶成为解决饲料用磷问题最有吸引力的途径。单胃动物饲料中通过添加植酸酶，可以提高饲料中植酸磷(或磷酸盐)的利用率，减少畜禽排泄物中磷的排出对环境和水的污染。随着生物技术特别是采用DNA重组技术后，使植酸酶在生产中的大量应用成为可能。作为动物饲料添加剂的微生物植酸酶已大量地商品化生产。 

在天然作物中，如玉米胚芽、大豆等中也含有植酸酶，但是其含量低，而且作物的生长周期长。以此提取植酸酶，成本太高、周期长，不适合于产业化。 

现有的植酸酶的生产是通过具有产植酸酶特性的菌种发酵得到，一般有两种发酵方法：固体发酵培养和液体发酵培养。现有的液体发酵培养，例如：培养基采用葡萄糖：30.0g；可溶性淀粉：30.0g；MgSO₄·7H₂O：0.5g；KCl：0.5g；Fe₂SO₄：0.03g；MnSO₄：0.03g；麦麸：5.0g；NH₄NO₃：5.0g；CaCO₃：5.0g混合后，用pH5.5的醋酸—醋酸钠缓冲液配制而成。液体培养基中接入黑曲霉—903，29℃发酵培养4d。现有的固体发酵培养的方法：可采用加水量为35％的麸皮作为培养基，接入黑曲霉AN00101，37℃，培养114h。无论是固体培养基还是液体培养基其成本均很高，因此一种成本低的用于制备植酸酶的方法成为本领域技术人员的目标。 

发明内容

本发明的所要解决的技术问题是，提供一种新的植酸酶的生产方法，其能够克服现有生产方法中的缺陷，采用一种成本低的固体成分作 为培养基进行发酵培养的方法。 

本发明的上述目的通过以下技术方案实现：一种生产植酸酶的方法，其特征在于：其是利用醋糟作为固体培养基，接种能够生产植酸酶的微生物菌种，进行发酵，从而得到植酸酶；其中所接种的微生物菌种优选：无花果曲霉(Aspergillus ficuum)。 

本发明所述的生产植酸酶的方法，其生产工艺过程为： 

(1)将醋糟培养基装入容器，调整培养基的含水量；(2)进行灭菌；(3)在无菌条件下进行接种微生物菌种；(4)发酵。 

本发明所述的生产植酸酶的方法，其接种量为：每15克的醋糟中接种无花果曲霉1×10⁶～5×10⁶个菌。 

其最佳接种量为：每15克的醋糟中接种无花果曲霉2×10⁶～4×10⁶个菌。 

本发明所述的生产植酸酶的方法，其培养基醋糟的含水量按重量计为50％～75％。 

培养基醋糟的含水量按重量计最佳范围为55％～65％。 

本发明所述的生产植酸酶的方法，发酵的时间为2～6天。 

最佳发酵的时间为2～4天。 

本发明所述的生产植酸酶的方法，其特征在于：所述灭菌的条件为：121℃、0.1MPa，时间为20分钟；所述发酵温度为27℃。 

利用微生物发酵生产植酸酶是该酶生产的唯一途径，本发明人在经过对醋糟的研究，发现醋糟中大约含有7％～15％的粗灰分、2％～9％粗脂肪、9％～15％的粗蛋白、27％～36％的粗纤维，0.20％～0.40％的钙、0.03％～0.08％的磷等营养成分，这些营养成分可以被二次发酵再利用。 

在二次发酵利用的研究过程中，意外地发现可以采用醋糟作为培养基生产植酸酶，其科技含量较高，而且具有原创性。而且与现有的植酸酶的生产方法相比，其培养基的成本大幅度地降低，本发明的培养基是采用生产醋的废弃物——醋糟，变废为宝，使醋糟得到了合理再利用。 

具体实施方式

本发明下面结合具体实施例详细描述本发明的内容，以便更好地了解本发明。