[发明专利]人脐带间充质干细胞的制备方法

权利要求书

1.一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征是由下述步骤组成：

(1)将人脐带去除残留血液，剪碎，用胶原酶消化；(2)再加入胰酶消化；(3)消化液用 筛网过滤，去除未消化组织；(4)将过滤后的消化液用磷酸缓冲液稀释；(5)离心，获得细 胞；(6)将细胞接种于培养基内进行培养，得到大量人脐带间充质干细胞，所述加入胶原酶 的重量为原料重量的0.05％-0.2％，消化温度为37℃，消化时间为30-60分钟；所述加入胰 酶的重量为原料重量的0.05％-0.2％，消化温度为37℃，消化时间为30-60分钟；所述消化 液与磷酸缓冲液的体积比为1∶8-12；离心机的转速为1000转-2000转/分钟，转10-20分 钟；所述细胞接种的培养基为无血清培养基。

2.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征是所述将人脐带剪 碎到1mm³的小块。

3.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征是所述加入胶原酶 的重量为原料重量的0.1％，所述消化时间为45分钟。

4.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征是所述加入胰酶的 重量为原料重量的0.125％，所述消化时间为45分钟，在所述消化过程中用转子搅拌。

5.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征是所述消化液与磷 酸缓冲液的体积比为1∶10。

6.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征是所述离心机的转 速为1500转/分钟，转15分钟。