[发明专利]一种禽用三联灭活疫苗及制备方法

权利要求书

1.一种禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：其采用生物组合配比，其中：灭活的3倍浓缩NDV La Sota株病毒液重量比：8.0～12.0％；灭活的3倍浓缩IBV M41株病毒液8.0～12.0％；灭活的EDSAV127株病毒液9.0～14.0％；并配合以白油50～70％，吐温-801～3％，司本-802～4％，硬脂酸铝1～3％，采用了纤维膜超滤浓缩法，采用低温灭活，采用新的佐剂，制成灭活疫苗的油苗。

2.如权利要求1所述的禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：其采用了纤维膜超滤浓缩法，纤维膜超滤浓缩装置，设有二级孔径不同的纤维滤柱，一级滤柱的纤维可滤除部分细菌和杂质，二级超滤株的中空纤维可截留病毒粒子。

3.如权利要求1所述的禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：其IBVM41病毒液创新采用低温灭活，2-8℃，经120-145小时，并将浓缩后的DNV La sota和EDSAV127病毒液，分别加入0.05～0.15％甲醛溶液，经35～38℃灭活12～17小时，可彻底灭活病毒，并不影响其免疫原性。

4.如权利要求1所述的禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：其采用的佐剂是白油、吐温-80、司盘，实验证明含油相和水相乳化剂的疫苗比仅含油相的疫苗免疫效果好，可使抗原充分混合均匀，不易分层，在37℃条件下更稳定，黏度也低。

5.如权利要求1所述的禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备：NDV La Sota株和IBV M41株毒种分别适当稀释，分别接种SPF鸡胚，EDSAV127毒珠种适当稀释接种10日龄鸭胚，孵育，收获.制苗用病毒液的制备，NDV La Sota株和IBV M41株毒种分别适当稀释，分别接种易感鸡胚，EDSAV127毒珠种适当稀释接种10日龄鸭胚，孵育；收活毒种.分别浓缩、灭活.取制苗用NDVLa Sota毒株液8.6％和IBV M41毒株液8.6％和EDSAV127株毒种10.8％；加吐温-80制成水相、用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相.水相与油相之比为1∶1.5，一起乳化，分装，帖签，装箱、入库。

6.如权利要求1所述的禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备：NDV La Sota株和IBV M41株毒种分别适当稀释，分别接种SPF鸡胚，EDSAV127毒珠种适当稀释接种10日龄鸭胚，孵育，收获；制苗用病毒液的制备(NDV La Sota株和IBV M41株毒种分别适当稀释，分别接种易感鸡胚，EDSAV127毒珠种适当稀释接种10日龄鸭胚，孵育，收活毒种.分别浓缩，灭活，取制苗用NDV La Sota毒株液9.6％，IBV M41毒株液9.6％，EDSAV127株毒种12.8％，加吐温-80制成水相，用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相，水相与油相之比为1∶2一起乳化.分装、帖签，装箱、入库.

7.如权利要求1所述的禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备：NDV La Sota株和IBV M41株毒种分别适当稀释，分别接种SPF鸡胚，EDSAV127毒珠种适当稀释接种10日龄鸭胚，孵育，收获；制苗用病毒液的制备NDV La Sota株和IBV M41株毒种分别适当稀释，分别接种易感鸡胚，EDSAV127毒珠种适当稀释接种10日龄鸭胚，孵育，收活毒种；分别浓缩，灭活，取制苗用NDV La Sota毒株液10.0％，IBV M41毒株液10.0％，EDSAV127株毒种13.5％，加吐温-80制成水相；用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相，水相与油相之比为1∶2.5一起乳化，分装，帖签，装箱，入库。

8.如权利要求1所述的禽用三联灭活疫苗及制备方法，其特征在于：生产用毒种的制备：NDV La Sota株、IBV M41株和EDSAV127毒种分别适当稀释同时接种SPF鸡胚，孵育，收获；制苗用病毒液的制备.：NDV La Sota株、IBV M41株和EDSAV127毒种分别适当稀释，同时接种易感鸡胚，孵育；收活毒种，灭活，加吐温-80制成水相，用白油、司本-80、硬脂酸铝制成油相，水相与油相之比为1∶2；一起乳化，分装，帖签，装箱，入库.