[发明专利]重组人卵巢癌抗独特型微抗体高密度发酵方法无效
| 申请号： | 200610030880.2 | 申请日： | 2006-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN101139623A | 公开（公告）日： | 2008-03-12 |
| 发明（设计）人： | 黄阳滨;孙九如;张翊;任军;刘勇;刘华 | 申请（专利权）人： | 上海新生源生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12N15/63;C12N15/70;C12N15/12;C12R1/19 |
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| 地址： | 200233上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 卵巢癌 独特 抗体 高密度 发酵 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种人卵巢癌抗独特型微抗体的生产方法，其特征在于，该方法包括步骤：
a)在适合的表达条件下，在摇瓶中培养宿主细胞，从而以包涵体形式表达出人卵巢癌抗独特型微抗体；
b)在适合的表达条件下，在5L发酵罐中优化出最佳中试生产方案。
2.如权利要求1所述的宿主细胞，其特征在于，它是大肠杆菌。
3.如权利要求1所述的宿主细胞，其特征在于，它含有一种原核表达载体。
4.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于，它是含有编码人卵巢癌抗独特型微抗体的核苷酸序列。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)所示的表达条件为：较佳培养基为改良M9-4培养基，摇瓶水平诱导起始菌密度选择在OD600 0.5～2.5之间，诱导时间在2到3小时的范围为最佳。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)所示的表达条件为：诱导OD600控制在1-2之间较佳，温度37℃，DO＞50％，OD600 1～2时用1mM的IPTG开始诱导，pH控制在6.8～7.2，诱导最佳时间应为3hr。
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