[发明专利]一种利用多菌种综合治理养殖水体制剂及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用多菌种综合治理养殖水体制剂，是通过在水体中直接添加，各菌种有效利用水体中富营养化的有机体，可迅速分解并转化水体中的各种有机污染物资，抑制有害藻类及病原菌生长，促进动物肠道中有益生物繁殖，形成适于水产动物生长的良性生态环境。属于农业生物制品技术领域。

背景技术

随着我国水产养殖集约化的蓬勃发展，养殖水环境污染日益严重，由于环境恶化造成的水产动物疾病或由此引发的传染性疾病大量剧增，已成为制约水产养殖业健康发展的主要障碍。长期使用抗生素和其他化学药物防治养殖病害已引发了一系列环境和社会问题，其突出表现为产品中抗生素和有害化学物质残留增加，水产品价格长期低迷。

1963年发现有益细菌可改善养殖水体环境，促进动物生长。Parker1974年首次使用“Probiohc(s)”一词来描述给动物使用的有益微生物，其定义为：有助于肠道菌群平衡的微生物和物质。在1994年的德国汉堡研讨会上，学者们将Probiotics狭义地定义为“改善微生物和酶的平衡，或刺激特异性和非特异性免疫机制的活菌和(或)死菌(包括组分和产物)”。Austin等用细菌、光和细菌、酵母菌和微藻来改善水产动物内外环境的微生物平衡，刺激特异性和非特异性免疫机制，促进生长，也将它们称为“Probiotics”。

迄今为止，在中改良水体的应用效果最明显的菌种主要有光合细菌、芽孢杆菌、乳酸菌、放线菌等，由于他们分属不同种属，光合细菌为光能自养，而其它种类为化能异养，芽孢杆菌为产芽孢菌，而其它种类为非芽孢菌，生长条件和营养需求差异巨大，当前改良水体的微生物制剂种类繁多，但多以单一菌种为主，而单一菌种的效果又仅仅体现在某一方面，所有常规发酵中很难将其功效有效地结合在一起，综合治理效果较差，部分复合菌剂虽含多种菌种，但含量较低，为10亿/克左右，难以在水体中形成优势菌群，同时由于液体制剂宜失活的特点，改良效果难以保证。而且当前市面上的光合菌由于该菌的活菌形态微细、比重小，若采用直接泼洒养殖水体的方法，其活菌不易沉降到池塘底部，无法起到良好的改善底环境的效果。

目前，已申请的专利，申请号为CN02111869.8，题为微胶囊益生净水复合菌修复水产养殖环境的方法，其特征在于：将从自然界分离出的光合细菌、芽孢菌、乳酸菌等多种有益菌株，通过组合发酵工艺培养，经冻干或微胶囊处理，最后复配成一种微胶囊益生净水复合菌。由于技术中菌株分属不同的种类(化能异养和光能自养、产芽孢和非产芽孢)，生长条件差别巨大，而未作专门的诱导和驯化培养，自然发酵中很难将其有机结合，同时采用微胶囊制粒和冷冻干燥，其菌体失活率高、生产成本大，改良效果难以保证。

发明内容

本发明的目的是提供一种使各菌种之间相互协调，有机互补，保证产品中各菌株在水体中发挥最佳的生理活性的利用多菌种综合治理养殖水体制剂及制备方法。

为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种利用多菌种综合治理养殖水体制剂，其特征在于，由下述重量百分比的原料配制而成：沼泽红假单胞菌25-32％、乳酸菌18-22％、啤酒酵母菌14-20％、枯草芽孢杆菌15-24％、放线菌3-27％。

本发明的制备方法，其特征在于，采用富集的多种改良水体的有益菌种，利用诱导选育与定向培养相结合进行优化选育，采用复合培养与驯化培养相结合的发酵技术，在发酵过程中添加适于多种菌体共生的生长因子，在后处理中添加适于菌体长期作用的载体，其步骤为：

第一步：生产菌株的选育

a.菌种选育：在健康的野生鲫鱼肠道的液体中分离出植物乳杆菌，在污水处理厂的活性污泥中分离出枯草芽孢杆菌，在啤酒发酵废料中分离出啤酒酵母菌，在养殖水体良好的虾塘中分离出沼泽红假单胞菌，在污水处理厂附近土壤中分离出放线菌，在实验室中作菌种保存；

b.诱导育种：将以上五种菌种在紫外线的照射下进行诱导，进行平板稀释计数，选育出体形规则、生长速度快、特征明显的菌株加以保存；

c.菌种摇瓶试验：将红假单胞菌接种子光合细菌培养基、植物乳杆菌接种于乳酸菌培养基、啤酒酵母菌接种于麦氏琼脂、枯草芽孢杆菌接种于营养琼脂中，在35-40℃温度下培养22-28小时，进行划线分离，选育出生长快、菌体特征明显的光合细菌、乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌、放线菌，在实验室中保存，再接种于以上的液体培养基中，在35-40℃温度下进行培养24-36小时的摇瓶培养，并活菌计数到至少10亿/克为止；