[发明专利]基于金属富勒烯的磁共振成像造影剂与抗体的耦联物和检测技术

权利要求书

1.一种基于金属富勒烯的磁共振成像造影剂与抗体的耦联物，其特征是：可按如下步骤制备：

(a)将含羧基的水溶性金属富勒烯衍生物用新鲜制备的1-乙基-3(3-二甲基-氨基-戊基)碳二亚胺盐酸盐水溶液活化；

(b)将相对于含羧基的水溶性金属富勒烯衍生物1/10～1/20摩尔当量的抗体加到步骤(a)得到的溶液中搅拌反应，即得到基于金属富勒烯的磁共振成像造影剂与抗体的耦联物；

所述的含羧基的水溶性金属富勒烯衍生物，其分子表达式为：

Gd@C₈₂O_m(OH)_n(NHCH₂CH₂COOH)₁或Gd@C₆₀[C(COOH)₂]₁₀，其中m＝2～6，n＝12～18，l＝6～8。

2.根据权利要求1所述的耦联物，其特征是：所述的抗体为绿色荧光蛋白抗体或肿瘤抗体。

3.根据权利要求1所述的耦联物，其特征是：所述步骤(a)中活化的时间为10～20分钟。

4.根据权利要求1所述的耦联物，其特征是：所述步骤(b)中反应的时间为3～4小时。

5.根据权利要求1所述的耦联物，其特征是：所述步骤(b)中反应的温度为15～25℃

6.一种权利要求1所述的耦联物中抗体是否具有活性的检测技术，包括以下步骤：

(a)修饰有生物素的牛血清白蛋白分别平铺在2块玻璃板上固定10～15分钟，而后用pH为7.0～7.5的磷酸盐缓冲溶液冲洗掉没固定上的牛血清白蛋白；

(b)分别加链霉亲和素使其与生物素发生耦联反应，10～15分钟后用pH为7.0～7.5的磷酸盐缓冲溶液冲洗掉没固定上的链霉亲和素；

(c)分别加绿色荧光蛋白抗体和耦联物，同样作用10～15分钟后用pH为7.0～7.5的磷酸盐缓冲溶液冲洗掉没固定上的绿色荧光蛋白抗体和耦联物；

(d)分别加等量的绿色荧光蛋白，作用10～15分钟后用pH为7.0～7.5的磷酸盐缓冲溶液冲洗掉没固定上的绿色荧光蛋白；

(e)用全反射荧光显微镜分别对上述对照物和耦联物成像，检测荧光强度，即可得知耦联物中抗体是否具有活性。