[发明专利]含有缺损的鞭毛蛋白基因的革兰氏阳性菌细胞、基于鞭毛蛋白的融合蛋白以及从液体中除去金属离子的用途

权利要求书

1.一种融合蛋白，其含有：

全部或部分细菌鞭毛蛋白，其中所述部分鞭毛蛋白包含所述鞭毛蛋白的N-端和C-端保守区；以及

异源多肽序列，位于所述鞭毛蛋白的可变区内或者代替所述鞭毛蛋白的可变区，

其中如果由革兰氏阳性菌细胞制备所述融合蛋白，那么所述融合蛋白具有能在所述革兰氏阳性菌细胞的表面上过表达的能力。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述异源多肽为具有结合金属离子能力的多肽。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其中所述金属离子选自镍、铜、镉、铂、钯、钛、银和金。

4.如权利要求1-3中任一项所述的融合蛋白，其中所述异源多肽为聚组氨酸序列。

5.如权利要求4所述的融合蛋白，其中所述聚组氨酸序列含有6个组氨酸残基。

6.如权利要求1-3中任一项所述的融合蛋白，其中所述异源多肽为酶或者酶的功能片段。

7.如权利要求6所述的融合蛋白，其中所述酶为脂肪酶。

8.如权利要求7所述的融合蛋白，其中所述脂肪酶为喜热噬油芽孢杆菌脂肪酶A。

9.如权利要求6所述的融合蛋白，其中所述酶为水解酶。

10.如权利要求6所述的融合蛋白，其中所述酶选自淀粉酶、蛋白酶、酯酶和纤维素酶。

11.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述异源多肽为免疫原。

12.如权利要求1-11中任一项所述的融合蛋白，还包括所述异源多肽N-端的1-15个接头残基N-端。

13.如权利要求1-11中任一项所述的融合蛋白，还包括所述异源多肽C-端的1-15个接头残基C-端。

14.如权利要求1-11中任一项所述的融合蛋白，还包括所述异源多肽N-端的N-端切割位点和所述异源多肽C-端的C-端切割位点。

15.一种编码权利要求1所述的融合蛋白的核酸。

16.一种含有权利要求15所述的核酸序列的载体。

17.如权利要求16所述的载体，其中所述核酸序列可操作性地与转录调控元件(TRE)连接。

18.一种含有权利要求17所述的载体的分离的细胞。

19.如权利要求18所述的细胞，其中所述细胞为原核细胞。

20.如权利要求19所述的细胞，其中所述细胞为细菌细胞。

21.如权利要求20所述的细胞，其中所述细胞为革兰氏阳性菌细胞。

22.如权利要求21所述的细胞，其中所述细胞是芽孢杆菌属的细胞。

23.如权利要求22所述的细胞，其中所述细胞是嗜碱芽孢杆菌种的细胞。

24.如权利要求23所述的细胞，其中所述细胞是2005年11月23日在NCIMB以保藏号___________保藏的BhFC04菌株。

25.一种制备融合蛋白的方法，所述方法包括培养权利要求18所述的细胞以及从培养物中得到所述融合蛋白。

26.一种DNA结构，其含有：

用于细菌鞭毛蛋白多肽的全部或部分编码序列，其中所述部分编码序列包含编码所述鞭毛蛋白的N-端和C-端保守区的核苷酸；以及

含有至少一个限制性酶位点的核苷酸序列，其插入到编码所述鞭毛蛋白多肽的可变区的序列中或者代替编码所述鞭毛蛋白多肽的可变区的序列。

27.如权利要求26所述的结构，其中所述细菌鞭毛蛋白为孢芽杆菌鞭毛蛋白。

28.如权利要求26所述的结构，其中所述孢芽杆菌鞭毛蛋白为嗜碱芽孢杆菌鞭毛蛋白(SEQ ID NO：1)。

29.如权利要求26-28中任一项所述的结构，其中将所述核苷酸序列紧邻SEQ ID NO：1的162-606位核苷酸之间的任意核苷酸之后插入。