[发明专利]具有减毒日本脑炎病毒基因作为主链的减毒嵌合黄病毒

权利要求书

1.编码减毒嵌合黄病毒的核酸分子，其包含编码日本脑炎病毒的衣壳蛋白、 前膜蛋白prM和非结构蛋白的核苷酸序列，和编码第二个黄病毒的包膜蛋白的 核苷酸序列，

其中所述嵌合黄病毒依次具有一个衣壳蛋白、一个前膜蛋白、一个包膜蛋 白和一个依次包含NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5的非结构 蛋白，

其中编码日本脑炎病毒的前膜蛋白和非结构蛋白的核苷酸序列包含产生使 病毒减毒的氨基酸取代的核苷酸突变，

其中所述取代为：SEQ ID NO：4中所示的prM蛋白的第1位甲硫氨酸被异 亮氨酸取代；SEQ ID NO：4中所示的prM蛋白的第148位天冬酰胺被苏氨酸取 代；SEQ ID NO：4中所示的NS2A蛋白的第4位丙氨酸被丝氨酸取代；SEQ ID NO：4中所示的NS4B蛋白的第51位天冬酰胺被赖氨酸取代；SEQ ID NO：4中 所示的NS4B蛋白的第52位缬氨酸被异亮氨酸取代；SEQ ID NO：4中所示的 NS4B蛋白的第68位苏氨酸被丝氨酸取代；SEQ ID NO：4中所示的NS5蛋白的 第126位亮氨酸被甲硫氨酸取代；和SEQ ID NO：4中所示的NS5蛋白的第854 位丝氨酸被天冬酰胺取代，

其中所述第二个黄病毒选自西尼罗病毒、登革1-4病毒、黄热病毒、圣路 易脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、库宁病毒、中欧脑炎病毒、贾萨努尔森林病毒、 墨累山谷脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、玻瓦散病毒、俄罗斯春夏季脑炎病 毒、Yokose病毒、Apoi病毒和Aroa病毒。

2.编码减毒嵌合黄病毒的核酸分子，其包含编码日本脑炎病毒的衣壳蛋白、 前膜蛋白prM和非结构蛋白的核苷酸序列，和编码第二个黄病毒的包膜蛋白的 核苷酸序列，

其中所述嵌合黄病毒依次具有一个衣壳蛋白、一个前膜蛋白、一个包膜蛋 白和一个依次包含NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5的非结构 蛋白，

其中编码日本脑炎病毒的前膜蛋白的核苷酸序列包含产生使病毒减毒的氨 基酸取代的核苷酸突变，

其中所述取代为SEQ ID NO：4中所示的prM蛋白的第1位甲硫氨酸被异亮 氨酸取代，并且

其中所述第二个黄病毒选自西尼罗病毒、登革1-4病毒、黄热病毒、圣路 易脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、库宁病毒、中欧脑炎病毒、贾萨努尔森林病毒、 墨累山谷脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、玻瓦散病毒、俄罗斯春夏季脑炎病 毒、Yokose病毒、Apoi病毒和Aroa病毒。

3.编码减毒嵌合黄病毒的核酸分子，其包含编码日本脑炎病毒的衣壳蛋白、 前膜蛋白prM和非结构蛋白的核苷酸序列，和编码第二个黄病毒的包膜蛋白的 核苷酸序列，

其中所述嵌合黄病毒依次具有一个衣壳蛋白、一个前膜蛋白、一个包膜蛋 白和一个依次包含NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5的非结构 蛋白，

其中编码日本脑炎病毒的前膜蛋白的核苷酸序列包含产生使病毒减毒的氨 基酸取代的核苷酸突变，

其中所述取代为SEQ ID NO：4中所示的prM蛋白的第148位天冬酰胺被苏 氨酸取代，并且

其中所述第二个黄病毒选自西尼罗病毒、登革1-4病毒、黄热病毒、圣路 易脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、库宁病毒、中欧脑炎病毒、贾萨努尔森林病毒、 墨累山谷脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、玻瓦散病毒、俄罗斯春夏季脑炎病 毒、Yokose病毒、Apoi病毒和Aroa病毒。

4.权利要求1所述的核酸分子，其中所述日本脑炎病毒是ML-17毒株。

5.权利要求2所述的核酸分子，其中所述日本脑炎病毒是MS-14毒株。

6.权利要求3所述的核酸分子，其中所述日本脑炎病毒是MS-15毒株。

7.由权利要求1-6中任一项所述核酸分子编码的减毒嵌合黄病毒。