[发明专利]树脂上肽环化

权利要求书

1.肽合成的方法，所述方法包括以下步骤：

a.合成连接于固相的肽，所述肽包含至少一个半胱氨酸、高-或去甲- 半胱氨酸残基，所述半胱氨酸在其侧链受到S-叔丁基-硫基的保护

b.使在其Nα上具有3，3’-二硫代-(1-羧基-丙基)-丙酰-基团的另一氨基 酸发生N-末端偶联，或使N-末端氨基酸的Nα脱保护并使该游离Nα与3，3’-二硫 代-丙酸亚胺反应获得相应的Nα-3，3’-二硫代-(1-羧基-丙基)-丙酰胺，或者使N- 末端氨基酸的Nα脱保护并使该游离Nα与式IV的化合物反应

R7-S-S-[CH₂]₂-COOH    IV

其中R7是包括杂核芳基的芳基-，或是芳烷基-、烷基芳基-或烷基-，

其可进一步被卤素、氨基、酯、羧基或醚所取代，

c.使该肽与S-叔丁基-硫基-保护基去除剂反应，

d.通过形成二硫键使所述肽环化，优选在空气和/或氧气的存在下环化所 述肽。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述半胱氨酸离开所述肽的 N-末端氨基酸残基至少3个，更优选至少5个氨基酸残基。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相树脂选自2-氯-三苯 甲基(CTC)树脂或产生酰胺的树脂。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肽具有至少一个其它侧链 保护基，该保护基包括受到不同保护的其它半胱氨酸、高-或去甲-半胱氨酸残 基。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述半胱氨酸是最后的C末 端残基。

6.如权利要求1或6所述的方法，其特征在于，至少S-叔丁基-硫基的去 除是通过使所述肽与三烷基膦反应完成的。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肽是在弱碱的存在下在极 性非质子溶剂中环化的。

8.如权利要求1或7所述的方法，其特征在于，所述肽与固相的连接键是 酸不稳定的，优选于室温下在60％TFA的二氯甲烷溶液中不稳定。

9.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述树脂是Sieber树脂。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，优选在全面脱保护的条件下， 在后继的步骤中将肽从树脂上切除。

11.式I的肽

其中R4、R5是H或Arg-保护基，R2是羧酸保护基，R3是Trp-保护基，R1是 以硫酯、酯或酰胺键连接到所述肽骨架的固相。

12.如权利要求11所述的肽，其特征在于，R4、R5是H，R3是N-苄-氧 羰基，R2是叔丁基。

13.如权利要求12所述的肽，其特征在于，所述固相是Sieber树脂，其随 后通过酰胺键连接到所述肽的骨架。

14.肽，其优选包含至少一个氨基酸侧链保护基，其中所述肽通过C-末端 残基或通过氨基酸侧链连接于固相，其特征在于，所述肽是包含式II部分的环 状肽：

其中n、m独立地选自1-10，Nα是该肽骨架的N-末端的氮，C^*是该肽骨架 氨基酸残基的Cα，R6是以所述Nα封端的该肽骨架的N-末端环状半部，R5是连 接到固相的该肽骨架的C-末端半部，前提是N≠Nα，优选其中R6包含至少3个， 更优选至少4个插入的氨基酸残基。

15.肽，其优选包含至少一个不是半胱氨酸、高或去甲-半胱氨酸残基上的 S-叔丁基-硫基的氨基酸侧链保护基，所述肽通过C-末端残基与固相连接，其 特征在于，所述肽包含在其侧链受S-叔丁基-硫基保护的至少一个半胱氨酸、 高或去甲-半胱氨酸残基，在其Nα经N-末端取代构成式III的酰胺部分

其中n＝1-10，优选n＝2。

16.肽，其优选包含至少一个不是半胱氨酸、高或去甲-半胱氨酸残基上的 S-叔丁基-硫基的氨基酸侧链保护基，所述肽通过C-末端残基与固相连接，其 特征在于，所述肽包含在其侧链具有游离巯基的至少一个半胱氨酸、高或去甲 -半胱氨酸残基，在其Nα经N-末端取代构成式III的酰胺部分

其中n＝1-10，优选n＝2。