[发明专利]血管新生治疗方法

说明书

【技术领域(相关申请案)】

本发明请求美国优先权，2004年8月20日申请的美国临时申请案60/603,016，名称为藉由血管内皮生长因子及乳糖基神经酰胺修饰血管新生之治疗方法，其所教示内容以参考资料合幷于本文。

【背景技术】

血管新生，当胚胎发育及创伤愈合时需要由存在一个该毛细血管芽生式(sprouting)，血管新生关于一系列的步骤，其中内皮细胞退化它们的局部基底薄膜(basement membrane)。接着，该内皮细胞迁移进入该结缔组织基质、增殖幷最后分化进入毛细管襻(capillary loop)。当在肢体及心肌缺血的实验动物和患者中已知VEGF增大测肢循环血流时，VEGF是血管新生的媒介物而且是有重要目的的。³¹再者，VEGF诱导血管形成已经被文件证明在动脉粥样硬化症、糖尿病视网膜病变和肿瘤转移。^3-5

虽然大部分研究已经集中在血管新生VEGF的角色上，已知少部分是关于基于关键表达型变化(phenotypic change)的机制。尤其，中性鞘糖脂(glycosphingolipid)的角色仍然未知。乳糖基神经酰胺是中性鞘糖脂家族的成员幷且藉由提供作为该神经结苷脂，例如单唾液酸神经节糖苷脂(monosialoganglioside)GM3、双唾液酸神经节糖苷脂(disialoganglioside)GD3、和globotriosyl神经酰胺(globotriosylceramide，Gb3)与硫酸乳糖基神经酰胺(LacCer)生物合成的前体，因此扮演重要的角色。当这些中性鞘糖脂被显示赋予不同的生物功能，乳糖基神经酰胺(LacCer)藉由自身的能力，已关于细胞增殖、细胞粘附及细胞迁移；这是血管新生全体地需求事件。最重要的是，发现LacCer诱导PECAM-1基因/蛋白质表达²²；开始血管新生的前提条件。^10，11

由旧有血管(血管新生(angiogenesis)和该内皮细胞(血管发生)(vasculogenesis)分化)的该新毛细血管芽生式是健康与疾病的表达型事件¹。血管内皮生长因子(VEGF)已被认为与血官发生与血关新生有关²。VEGF异常的表达已被记载于许多血管病理学，例如炎症、糖尿病幷发症、心血管疾病及肿瘤转移³。VEGF结合自身受体KDR/Flk-1，在生理学条件和人类动脉粥样硬化症去媒介对于血官新生的影响^4-6。

血小板内皮细胞粘附分子(PECAM-1/CD31是本质地在内皮细胞中表达整合蛋白。此外，PECAM-1表达于血小板、单核细胞、中心粒细胞和特定T细胞亚群⁸。近来的研究透露PECAM-1在血管新生和体外内皮细胞迁移可能的角色^9，10。例如，人类内消旋内皮瘤(mesoendothelioma)细胞系(REN)的植入(PECAM-1的缺陷)无法诱导裸鼠血管新生。相对地，REN细胞¹⁰过度表达的PECAM-1确实诱导这些裸鼠血管新生¹¹。进一步地，使用单克隆PECAM-1抗体抑制小鼠肿瘤血管新生¹²。最近，O’Brein等人于研究揭露PECAM-1在血管新生的重要角色¹³。他们发现人类全长PECAM-1cDNA的转染在REN细胞中免疫-酪氨酸相关的抑制基序(ITIM)带有突变，抑制这些细胞迁移对VEGF的反应和无法在该活体外血管新生试验形成管子(tube)。