[发明专利]使用纯化的氢溴酸制备多肽混合物的方法

说明书

贯穿本申请，将各种出版物充分引用作为参考。这些出版物的公开内容全部特此结合于本申请作为参考以更充分地描述与本发明相关的现有技术。

发明背景

被称作醋酸格拉默(Glatiramer acetate)(GA)的、不是都具有相同氨基酸序列的多肽混合物在商标名下进行市售，其包括这样的多肽的醋酸盐，所述多肽分别以0.141，0.427，0.095和0.338的平均摩尔级分包含L-谷氨酸，L-丙氨酸，L-酪氨酸，和L-赖氨酸。的平均分子量为4,700-11,000道尔顿(″Copaxone″，内科医师必读，(2000)，MedicalEconomics Co.，Inc.，(Montvale，NJ)，3115.)。在化学上，醋酸格拉默被称为含有L-丙氨酸，L-赖氨酸，L-酪氨酸的L-谷氨酸聚合物，醋酸盐(盐)。它的结构式是：

(Glu，Ala，Lys，Tyr)_x·XCH₃COOH

(C₅H₉NO₄·C₃H₇NO₂·C₆H₁₄N₂O₂·C₉H₁₁NO₃)_x·XC₂H₄O₂

CAS-147245-92-9

(″Copaxone″，内科医师必读，(2000)，Medical Economics Co.，Inc.，(Montvale，NJ)，3115.)。

醋酸格拉默被批准用于在患有间歇复发型多发性硬化的患者中减少复发的频率。多发性硬化被归类为自体免疫性疾病。还已经公开了将醋酸格拉默用于治疗其它自体免疫疾病(R.Aharoni等的公开号.US2002/0055466A1)，炎性非自体免疫疾病(V.Wee Yong等的公开号US2005/0014694 A1；和公开于2002年6月20日的美国专利申请号2002/0077278 A1，(Young等))，并且用于促进神经再生和/或防止或抑制继发变性，所述继发变性可以接着原发性神经系统损伤发生(M.Eisenbach-Schwartz等的公开号US 2003/0004099 A1；和公开于2002年3月28日的美国专利申请号2002/0037848(Eisenbach-Schwartz))。此外，公开了将醋酸格拉默用于治疗免疫介导疾病(例如，授权于2003年2月4日的美国专利号6,514,938B1，(Gad等)；公布于2001年8月23日的PCT国际公开号WO 01/60392，(Gilbert等)；和公布于2000年5月19日的PCT国际公开号WO 00/27417，(Aharoni等)以及与脱髓鞘作用相关的疾病(公布于2001年12月27日的PCT国际公开号WO-1/97846，(Moses等)。

在上述专利中详细描述的制备方法包括使被保护的多肽与在乙酸中的33％氢溴酸反应(1998年9月1日授权于Konfino，等的美国专利号5,800,808)。这种去保护反应将γ苄基保护基从谷氨酸残基的5-羧酸酯上去除，并且将所述聚合物裂解为更小的多肽以形成三氟乙酰基多肽(1998年9月1日授权于Konfino，等的美国专利号5,800,808)。获得介于7,000±2,000道尔顿的正确平均分子量的GA所需要的时间取决于反应温度和被保护的醋酸格拉默的分子量模式(1998年9月1日授权于Konfino，等的美国专利号5,800,808)。去保护发生在介于20℃和28℃之间的温度(1998年9月1日授权于Konfino，等的美国专利号5,800,808)。测试反应在不同的时间阶段在每个批次上进行，以确定在给定温度上获得正确分子量模式的三氟乙酰基多肽所需要的反应时间(1999年11月9日授权于Konfino，等的美国专利号5,981,589)。反应所需要的时间的量的范围，例如介于10和50小时之间(1998年9月1日授权于Konfino，等的美国专利号5,800,808)。此外，美国专利号5,981,589，6,048,898，6,054,430，6,342,476，6,362,161，和6,620,847还涉及用于制备多肽的混合物，包括GA的组合物和方法。

本发明提供改善的制备方法。

发明简述