[发明专利]哇巴因结合肽或蛋白质及其在治疗高血压中的应用

权利要求书

1、哇巴因结合肽或蛋白质，其特征在于其中含有(Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His-Arg-Pro-Trp-Thr)氨基酸系列。

2、哇巴因结合肽或蛋白质在治疗高血压中的应用。

3、根据权利要求2所述的哇巴因结合肽或蛋白质在治疗高血压中的应用，哇巴因结合肽或蛋白质是含有一种新发现的氨基酸序列(Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His-Arg-Pro-Trp-Thr)，并应用含有此序列的多肽或蛋白用于高血压的治疗。

4、根据权利要求1所述的哇巴因结合肽或蛋白质在治疗高血压中的应用，其特征在于，哇巴因结合肽具有阻断或拮抗哇巴因抑制钠泵的作用，可由哇巴内结合肽(OCP)体外生物学活性实验证实。

5、根据权利要求1所述的哇巴因结合肽或蛋白质在治疗高血压中的应用，其特征在于，哇巴因结合肽(蛋白)具有降低血压的作用，可由哇巴因结合肽药理学实验证实。

6、根据权利要求1所述的哇巴因结合肽或蛋白质在治疗高血压中的应用，其特征在于，哇巴因结合肽急性毒性小，可由哇巴因结合肽急性毒性实验证实。

7、哇巴因结合肽或蛋白质的筛选方法，其特征在于：

(1)卵清蛋白—哇巴因(OVA-Ouabain)耦联物的制备：哇巴因加入NalO₄后进行搅拌，加入卵清蛋白，搅拌，加入硼氢化钠形成等体积的饱和(NH₄)₂SO₄溶液，最后溶解沉淀、透析。

(2)生物淘洗：OUA-OVA耦联物包被酶标板后，加入TBST洗液和稀释噬菌体文库，弃去未与噬菌体结合的噬菌体，再加入glycine-HCl收集洗脱液。

(3)吸附实验：OVA包被酶标板后，加入TBST洗液，将已经过淘筛的噬菌体加入酶标板，收集未与噬菌体结合的噬菌体。

(4)快速纯化噬菌体测序模板及测序：噬菌体蓝斑扩增后，对噬菌体测序模板进行纯化、测序及序列分析，最后由多肽合成仪合成哇巴因结合肽。