[发明专利]蚕丝心蛋白转基因棉纤维及其基因工程生产方法

权利要求书

1.一种转基因棉纤维，其特征在于，它是动物丝心蛋白转基因棉纤维。

2.如权利要求1所述的转基因棉纤维，其特征在于，所述的动物丝心蛋白是蚕丝心蛋白。

3.一种如权利要求1或2所述的转基因棉纤维的基因工程生产方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

a.棉纤维特异表达基因的克隆；

b.动物丝心蛋白基因的克隆；

c.转基因表达载体的制备；

d.棉花转化。

4.如权利要求3所述的转基因棉纤维的基因工程生产方法，其特征在于，所述的棉纤维特异表达启动子为GAE6-3A启动子，其核苷酸序列为SEQIDNo.1，长1457个碱基对。

5.如权利要求3所述的转基因棉纤维的基因工程生产方法，其特征在于，PCR扩增了蚕丝心蛋白基因，其核苷酸序列见SEQ ID No.2，并亚克隆至pPGEM-T载体中构建了质粒TFBN。

6.如权利要求3所述的转基因棉纤维的基因工程生产方法，其特征在于，所述的转基因表达载体为HAN，它是由GAE6-3A启动子驱动的植物转基因二元载体，含有35S启动子启动的含有内含子的GUS基因，该载体由北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNO.0726。

7.如权利要求3所述的转基因棉纤维的基因工程生产方法，其特征在于，BKT质粒经SacI/BamHI双酶切后与TFBN经BamHI/EcoRV双酶切后连接，后用HindIII/SacI双酶切后与2301质粒经HindIII/Sac I双酶切后连接构建了转基因表达载体HAN。