[发明专利]聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的诊断方法

权利要求书

1，一种聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法，以微量目的基因两端或两侧已知核苷酸序列设计一对引物，以待鉴定DNA作为模板进行扩增(PCR法)，特征在于：以PCR产物为模板再次扩增，选取相应检测对象DNA全序列中较保守且特异性较高的几十个甚至几个核苷酸进行短片段DNA测序。

2，根据权利要求1所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法，特征在于：短片段DNA测序中引物设计是根据与疾病相关且基因序列已知的DNA而设计的。

3，根据权利要求1、2所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法，特征在于：测序引物是根据与高发的遗传病、有遗传倾向的疾病相关的已知基因序列设计的。

4，根据权利要求1、2所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法，特征在于：根据外源入侵的致病基因设计引物或探针。

5，根据权利要求4所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法，特征在于：可选择其基因中的保守区作通用检测。

6，根据权利要求4所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法，特征在于：可选定差异较大的基因部位作分型检测。

7，根据权利要求1、2所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法的用途，特征在于：通过设计针对癌基因、抗癌基因及抗转移基因的特异性引物进行PCR扩增及短片段测序，可以断定癌基因、抗癌基因及抗转移基因的突变性。

8，根据权利要求1、2所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法的用途，特征在于：针对肌红蛋白小卫星基因，β-珠蛋白基因、ApoB基因设计引物，根据多态性和重复次数的差异应用于鉴定DNA指纹、个体识别、亲子关系和物种研究。

9，根据权利要求1、2所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法的用途，特征在于：针对烈性传染病病原体设计引物，用于检疫人员、动、植物是否携带烈性传染病病原体，以及食品、饲料等是否带沙门氏菌。

10，根据权利要求1、2所述的聚合酶链反应与短片段DNA测序相结合的方法的用途，特征在于：用于检查转基因动植物中植入基因的存在。