[发明专利]免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗及其制备方法

权利要求书

1、一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，它是包含有乙肝病毒表面抗原的脂质体。

2、根据权利要求1所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其特征在于它包含有免疫调节分子。

3、根据权利要求1或2所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中所述的乙肝病毒表面抗原是选自S，S+前S1，前S1+前S2，S+前S2及S+前S1+前S2。

4、根据权利要求3所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中优选的乙肝病毒表面抗原是选自S+前S2及S+前S1+前S2。

5、根据权利要求4所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中最优选的乙肝病毒表面抗原是S+前S1+前S2。

6、根据权利要求1或2所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中单位剂量的疫苗中含有的乙肝病毒表面抗原1-80ug。

7、根据权利要求6所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中单位剂量的疫苗中含有的乙肝病毒表面抗原优选量是20-30ug。

8、根据权利要求1或2所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中所述的脂质体是磷脂、非磷脂、固醇类及它们的衍生物和膜材组成。

9、根据权利要求8所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中所述的脂质体选自大豆卵磷脂，豆磷脂，磷脂酰乙醇胺、胆固醇、脑磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、胆固醇乙酰脂质体、B-谷甾醇、牛胆酸钠、蛋磷脂酰胆碱、二棕榈酰-DL-a磷脂酰胆碱、磷脂酰丝胺酸、磷脂酰肌醇、神经鞘磷脂、鞘髓磷脂、二鲸蜡磷酸酯、二肉豆蔻卵磷脂、硬脂酰胺、二氧乙烯十六烷基醚和四氧乙烯十二烷基醚等。

10、根据权利要求8所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中所述的脂质体的球径是20～5000nm。

11、根据权利要求10所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中所述的脂质体优选的球径是100～200nm或950-1050nm。

12、根据权利要求1或2所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中单位剂量的疫苗中含有的脂质体量是0.3-1.5ml。

13、根据权利要求12所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中单位剂量的疫苗中含有的脂质体优选量是0.5-1.0ml。的疫苗中含有的脂质体优选量是0.5-1.0ml。

14、根据权利要求2所述的一种免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗，其中含有的免疫调节分子选自胸腺肽、白细胞介素-2、LAK细胞、免疫核糖核酸、特异性转移因子、肝炎灵、猪苓多糖、香菇菌多糖、云苓、辅酶Q10、左旋咪唑、脂质A、MPL、QuilA、BCG等。

15、一种制备免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗的方法，包括如下步骤：

(1)将脂质体、膜材或免疫调节分子以摩尔比1∶1∶1溶于溶媒中，置于旋转蒸发器中，除去有机溶媒，旋转蒸发形成磷脂膜；

(2)加入磷酸缓冲液，40-60℃，超声3-8分钟，形成脂质体悬液；

(3)将脂质体悬液与乙肝抗原溶液以摩尔比3∶1混合，加入冷冻保护剂，进行冷冻干燥；

(4)采用湿热法或钴照射等方法灭菌，得到冻干粉剂；

(5)加无菌水、震荡、再水化融合；

(6)得到免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗。

16、一种制备免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗的方法，包括如下步骤：

(1)将脂质体、膜材或免疫调节分子以摩尔比1∶1∶1溶于溶媒中，加入乙肝抗原溶液，40-60℃，短时超声3-8分钟，得到稳定的油包水乳液；

(2)40-60℃，减压蒸发，得到胶态物质；

(3)加入磷酸缓冲液，40-60℃旋转蒸发，减压蒸发10-20分钟，除去微量有机溶媒，得到脂质体水性混悬液，放置20-40分钟，透析20-30小时，除去游离的未包入脂质体的乙肝抗原；

(4)采用湿热法或钴照射等方法灭菌；

(5)得到免疫性脂质体治疗性乙肝疫苗。