[发明专利]包含表皮生长因子作为活性成分的稳定组合物

说明书

技术领域

本发明涉及包含表皮生长因子(下文中称作“EGF”)作为活性成分的稳定组合物。更具体地说，本发明涉及包含具有生物活性的EGF和能显著增加水溶液中EGF的稳定性的羧乙烯基聚合物基质的稳定组合物。

EGF(即尿抑胃素)是由53个氨基酸残基组成并包括3个二硫键的、分子量为6045的多肽。EGF被认为是皮肤和角膜的伤口愈合剂以及胃溃疡愈合剂，因为它表现出良好的刺激各种细胞包括表皮细胞和间充质细胞的有丝分裂及其生长和控制胃酸分泌的活性。(美国专利第140998号；Carpenter，实验细胞研究，164：1-10，1986)。

尽管EGF显示出良好的在体外刺激表皮细胞分化的活性，但开发用于治疗皮肤和角膜伤口的含有EGF的局部制剂是非常困难的，原因是当EGF临床应用于伤口时只有很小的治疗伤口的作用。

EGF是生物学上不稳定的和物理化学上非同质的，所以它的愈合作用不充分且它的分解产物可能诱导变态反应。因此EGF在应用于活体时不能显示出充分的治疗伤口的作用。EGF在室温下非常不稳定，特别是在水分的存在下。尽管伤口上DNA的合成需要约8至12小时的延滞时间，但EGF具有非常短的、约为1小时的半衰期，因而无法获得所需作用。另外，EGF在室温下、甚至在冷藏状态下长时间储存时会产生物理化学变性。当EGF施用到皮肤上时，因伤口中存在蛋白水解酶而引起的EGF的变性、分解、凝缩和沉淀导致EGF丧失生物活性(Manning等，药学研究，6：903-917，1989)。

为了克服EGF的生物不稳定性和提供其期望的伤口愈合作用，报道了在对于伤口愈合来说最重要的治疗的最初几天时间里将EGF连续施用到伤口上，以不断地保持EGF的有效浓度(Frankline等，实验与临床医学杂志，108：103-108，1986)。在这点上，已研究了一些EGF持续释放制剂，它们可以连续地提供EGF到伤口上。

结果，美国专利第4,944,948号公开了使用中性磷脂、负电荷磷脂和胆固醇连续地将EGF提供到伤口的EGF/脂质体凝胶制剂；EP出版物第312208号公开了包含药学上可接受的各种水溶性或水膨胀性聚合物基质的、能连续释放EGF的含水制剂。但是,尽管上述在先技术公开了能连续12小时或更久释放EGF的制剂，但它们不适合在工业领域中生产，因为这些制剂长期储存时不稳定。因此，一直以来都需要能长时间地保持EGF的生物活性及其物理化学稳定性诸如纯度和同质性，以提供EGF作为药物的足够的伤口愈合作用。

作为保持EGF的物理化学稳定性和抑制EGF活性下降的方法，EP公开第205051号提供了皮肤和眼用膏霜形式的药物组合物，它包含0.0001-0.005％(w/w)的EGF，1-10％(w/w)的表面活性剂，5-45％(w/w)的脂肪物质和0.3-0.8％(w/w)的防腐剂。EP出版物第267015号和美国专利第4717717号提供了通过向EGF中加入水溶性纤维素衍生物使其稳定的含有EGF的组合物。EP出版物第398615号和美国专利第5130298号提供了通过将EGF与药学上可接受的金属阳离子诸如锌混合来稳定EGF的方法，锌能够防止EGF在水溶液中降解，因为EGF与锌发生离子键合。

然而，尽管加入了上述稳定剂，但EGF的稳定性在4℃下只能维持约2个月。因此，当在临床上将EGF的皮肤用局部制剂应用于伤口时，它们不适合在工业领域中采用，因为它们具有很小的伤口愈合作用且制剂的稳定性降低。

因此，非常希望开发出用于治疗不能治愈的病状等诸如在没有特定治疗剂的情形下的皮肤溃疡或角膜损伤等的EGF的成品制剂，它们能充分地显示出伤口愈合作用，具有能对抗生物活性损失的保护的EGF，并且当其应用时能从载体中快速地释放出EGF到伤口上。

因此，本发明人已进行了很多研究来研制具有足够的伤口愈合作用和良好稳定性的EGF的局部制剂。结果，我们发现包含EGF作为活性成分和酸性聚合物诸如羧乙烯基聚合物作为基质的局部制剂可以显示出所需的良好的伤口愈合作用和与使用诸如纤维素基聚合物基质或中性聚合物基质的在先技术相比的显著的稳定性。

发明的公开

因此本发明的目的是提供含有EGF的生物学和物理化学稳定的组合物，它包含EGF作为活性成分和羧乙烯基(carboxyvinyl)聚合物作为基质(base)。