[发明专利]生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的基因工程菌以及生产GLP-1(7-36)的方法无效
| 申请号: | 01126278.8 | 申请日: | 2001-07-19 |
| 公开(公告)号: | CN1363654A | 公开(公告)日: | 2002-08-14 |
| 发明(设计)人: | 孙玉昆;伍登熙;巫爱珍;朱志勇;余刚;周加祥;赵少陵 | 申请(专利权)人: | 上海华谊生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12P21/02 |
| 代理公司: | 上海华工专利事务所 | 代理人: | 应云平 |
| 地址: | 20023*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 生产 胰岛素 分泌 glp 36 基因工程 以及 方法 | ||
1.一种生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的基因工程菌,其特征在于:该基因工程菌携带的质粒中包含有表达GLP-1(7-36)的基因,宿主细胞为大肠杆菌。
2.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于:所述质粒中包含有n个表达GLP-1(7-36)的基因,其中,n为从1到32的整数。
3.根据权利要求2所述的基因工程菌,其特征在于:所述质粒中包含有16个表达GLP-1(7-36)的基因。
4.根据权利要求1或2或3所述的基因工程菌,其特征在于:所述的大肠杆菌是JM103,JM109或DH5α。
5.根据权利要求1或2或3所述的基因工程菌,其特征在于:所述质粒的启动子为Lac,PL,Tac,PT7或Trp。
6.一种生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的基因工程菌的构建方法,包括将n个表达GLP-1(7-36)的基因克隆于质粒中,并将质粒转化到宿主细胞大肠杆菌中,其中,n为从1到32的整数。
7.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于:所述的宿主细胞大肠杆菌是JM103,JM109或DH5α。
8.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于:所述的质粒的启动子为Lac,PL,Tac,PT7或Trp。
9.一种生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的方法,包括构建权利要求1或2或3或4或5定义的基因工程菌,然后在液体培养基中进行发酵培养,产生和积累含有GLP-1(7-36)的包涵体,通过细胞破碎和包涵体的分离纯化得到融合蛋白,再经过融合蛋白裂解以及GLP-1(7-36)的纯化得到产品。
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