[发明专利]生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的基因工程菌以及生产GLP-1(7-36)的方法无效

专利信息
申请号: 01126278.8 申请日: 2001-07-19
公开(公告)号: CN1363654A 公开(公告)日: 2002-08-14
发明(设计)人: 孙玉昆;伍登熙;巫爱珍;朱志勇;余刚;周加祥;赵少陵 申请(专利权)人: 上海华谊生物技术有限公司
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/70;C12P21/02
代理公司: 上海华工专利事务所 代理人: 应云平
地址: 20023*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 生产 胰岛素 分泌 glp 36 基因工程 以及 方法
【权利要求书】:

1.一种生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的基因工程菌,其特征在于:该基因工程菌携带的质粒中包含有表达GLP-1(7-36)的基因,宿主细胞为大肠杆菌。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于:所述质粒中包含有n个表达GLP-1(7-36)的基因,其中,n为从1到32的整数。

3.根据权利要求2所述的基因工程菌,其特征在于:所述质粒中包含有16个表达GLP-1(7-36)的基因。

4.根据权利要求1或2或3所述的基因工程菌,其特征在于:所述的大肠杆菌是JM103,JM109或DH5α。

5.根据权利要求1或2或3所述的基因工程菌,其特征在于:所述质粒的启动子为Lac,PL,Tac,PT7或Trp。

6.一种生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的基因工程菌的构建方法,包括将n个表达GLP-1(7-36)的基因克隆于质粒中,并将质粒转化到宿主细胞大肠杆菌中,其中,n为从1到32的整数。

7.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于:所述的宿主细胞大肠杆菌是JM103,JM109或DH5α。

8.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于:所述的质粒的启动子为Lac,PL,Tac,PT7或Trp。

9.一种生产促胰岛素分泌肽GLP-1(7-36)的方法,包括构建权利要求1或2或3或4或5定义的基因工程菌,然后在液体培养基中进行发酵培养,产生和积累含有GLP-1(7-36)的包涵体,通过细胞破碎和包涵体的分离纯化得到融合蛋白,再经过融合蛋白裂解以及GLP-1(7-36)的纯化得到产品。

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