[发明专利]酯酶同工酶诊断试剂盒的制备

权利要求书

1、一种酯酶同工酶诊断试剂盒的制备，做醋酸纤维素薄膜电泳时，其包括有：(1)、配制浓度为0.03mol/L-0.1mol/L电极液，PH为7.5-9.0；(2)、配制浓度为0.05mol/L-0.2mol/L泡电泳膜缓冲液；(3)、将冰乙酸做为固定液，用时加水稀释；其特征在于：如(2)所述的泡电泳膜缓冲液分装安瓿A；如(3)所述的固定液分装安瓿G；(4)、显色液的配制：(a)、将底物分装安瓿B；(b)、溶剂分装安瓿C；(c)、将浓度为0.05～0.25mol/L缓冲液分装安瓿D；(d)、将重氮盐染料分装安瓿E；(e)、将琼脂糖分装安瓿F；其中将所述安瓿B内的底物、安瓿E内的重氮盐染料、安瓿F内的琼脂糖按重量百分比，其所占比例分别是14.4％-83.3％，12.8％-85.4％，1.5％-28.6％；按上述比例，用时先将安瓿B内的底物、10～30微升安瓿C内的溶剂混合，然后将安瓿D内1～2.5ml浓度为0.05～0.25mol/L的缓冲液和安瓿E内的重氮盐染料混合溶解，将安瓿F内的琼脂糖加水加热溶解，然后将安瓿B内的底物和安瓿C内的溶剂的混合液，安瓿D内的缓冲液和安瓿E内的重氮盐染料的混合液、安瓿F内的琼脂糖溶解后混合，即为显色液。

2、一种酯酶同工酶诊断试剂盒的制备，做琼脂糖凝胶电泳时，其包括有：(1)、配制浓度为0.03mol/L-0.1mol/L电极液，PH为7.5-9.0；(2)、将冰乙酸做为固定液，用时加水稀释；其特征在于：如(2)所述固定液分装安瓿G；(3)、配制琼脂凝胶：将琼脂糖或琼脂、泡电泳膜缓冲液、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮分装安瓿A，其中琼脂糖或琼脂、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮(按重量百分比)其比例分别为7.0％-32.3％，55.6％-91.0％，1.4％-19.4％，泡电泳膜缓冲液是80～120ml的浓度为0.05mol/L-0.2mol/L缓冲液，将琼脂糖或琼脂、泡电泳膜缓冲液、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮加热溶解，趁热分装，制备为安瓿A；(4)、显色液的配制：(a)、将底物分装安瓿B；(b)、溶剂分装安瓿C；(c)、将浓度为0.05～0.25mol/L缓冲液分装安瓿D，(d)、将重氮盐染料分装安瓿E；

其中将所述安瓿B、安瓿E按重量百分比，所占比例分别是12.5％-85.7％，14.3％-87.5％；用时将安瓿B加入10～30微升安瓿C内的溶剂，将1～2.5ml安瓿D内浓度为0.05～0.25mol/L的缓冲液，加入安瓿E内，然后将安瓿B、安瓿C的混合液与安瓿D、安瓿E的混合液混合，即为显色液。

3、根据权利要求1、2所述的一种酯酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述显色液的配制：此处也可制备为冻干试剂，制备如下：将底物、重氮盐染料、琼脂糖按重量百分比，其所占比例分别是14.4％-83.3％，12.8％-85.4％，1.5％-28.6％；将琼脂糖分装安瓿F；按上述比例，将底物、10～30微升溶剂和1～2.5ml浓度为0.05～0.25mol/L的缓冲液分装安瓿B，经冰冻干燥后或直接低温冷冻保存，经冰冻干燥后的用时加蒸馏水溶解即可，直接低温冷冻保存的可直接使用；按上述比例，将1～2.5ml浓度为0.05～0.25mol/L的缓冲液和重氮盐染料分装安瓿C，经冰冻干燥后或直接低温冷冻保存，经冰冻干燥后的用时加蒸馏水溶解即可，直接低温冷冻保存的可直接使用；用时将安瓿B、安瓿C混合，将安瓿F加水加热溶解，然后将安瓿B和安瓿C的混合液，安瓿F溶解后混合，即为显色液。

4、根据权利要求3所述的一种酯酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述琼脂糖凝胶的配制为：将琼脂糖或琼脂、浓度为0.05mol/L-0.2mol/L泡电泳膜缓冲液分装安瓿A，其中所述琼脂糖或琼脂0.5g～1g，加入80～120ml的缓冲液，加热溶解，趁热分装。

5、根据权利要求1、3所述的一种酯酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于缓冲液分装安瓿D，可用醋酸缓冲液或磷酸盐缓冲液。

6、根据权利要求1、3所述的一种酯酶同工酶诊断试剂盒的制备，其特征在于所述显色液的配制中，安瓿B中的底物可以是多种萘酚衍生物，如萘酚AS-D氯醋酸、萘酚AS乙酸、萘酚AS-LC乙酸、α-或β-萘酚乙酸酯、α-萘酚丙酸等；也可以是吲哚酚的衍生物作底物，如5｀-溴吲哚酚乙酸酯、5-溴-4(或6)-氯吲哚酚乙酸酯。