[发明专利]利用转基因真菌生产人胰岛素的方法

权利要求书

1.向真菌导入外源的人工合成的人胰岛素基因，获得能高效表达人胰岛素的真菌。其中人工合成的胰岛素基因的密码子的采用，应包括不同生物偏爱的密码子的改造。包括采用植物、真菌及其它物种的偏爱性的密码子。

2.权利要求1中，人胰岛素基因的合成包括其它完整人胰岛素基因或和部分人胰岛素基因序列的合成与应用，以及人胰岛素基因与其它多肽序列的融合基因的合成与应用。

3.权利要求1中的人胰岛素基因是置于一种在真菌中高效表达的启动子的驱动之下。这种启动子应包括所有可在真菌中调控人胰岛素基因的DNA序列。

4.权利要求1中关于人胰岛素基因的高效表达。在说明书中已提到采用一种来自细菌的血红蛋白基因以促进真菌的需氧代谢，从而提高人胰岛素的产量。所以导入的外源基因，除人胰岛素基因的启动子序列之外，还应包括另外的增强人胰岛素表达的另外的外源基因的应用。

5.权利要求1中涉及导入外源基因的方法。除了在实施方案中提到的电激方法，还应包括其它方法，如基因枪法和通过PEG的应用、PH和Ca离子的调节等方法将外源基因导入真菌细胞。

6.权利要求1中，将外源基因导入真菌细胞，既包括菌丝体细胞及其原生质体，也包括直接将基因导入真菌的孢子和真菌的其它类型组织，如子实体。