[发明专利]基因多态性检测方法

权利要求书

1、一种基因多态性检测方法，以引物延伸反应为基础，其特征在于，包括以下步骤：a、制备待测目标基因的碱基特异性引物集合；b、进行引物集合的延伸反应；c、区分大量引物延伸产物与其他成分，其它成分包括来延伸的引物和用于引物延伸反应的dNTP混合物。

2、如权利要求1所述的基因多态性检测方法，其特征在于：碱基特异性引物集合包括不同引物的亚集合、每一亚集合中的引物都含有类似的碱基序列、至少有一个相应的不互补碱基、分别是A或C或G或T。

3、如权利要求1,2所述的基因多态性检测方法，其特征在于引物集合为配对引物集合，或未配对引物集合；配对引物集合包括碱基特异性引物集合和与其配对的引物，未配对引物集合只包含碱基特异性引物集合。

4、如权利要求3所述的基因多态性检测方法，其特征在于：碱基特异性引物集合为未标记的引物，或3′末端标记的引物，或多于一个碱基标记的引物。

5、如权利要求4所述的基因多态性检测方法，其特征在于：当使用3′未端标记的引物或多于一个碱基标记的引物进行引物延伸反应时只使用未标记的dNTPs；当使用未标记的引物进行引物延伸反应时使用未标记的dNTPs与标记的碱基混合物。

6、如权利要求1所述的基因多态性检测方法，其特征在于：引物延伸反应时，先将碱基特异性引物集合固定在特定的固相上进行固相引物延伸反应，或将碱基特异性引物集合直接加入液相中进行液相引物延伸反应。

7、如权利要求6所述的基因多态性检测方法，其特征在于：固相引物延伸反应以液相引物延伸反应的产物作为引物延伸反应模板。

8、如权利要求6所述的基因多态性检测方法，其特征在于：引物延伸反应使用DNA聚合酶包括DNA依赖性DNA聚合酶和RNA依赖性DNA聚合酶，在37℃或37℃以上进行。

9、如权利要求1,5所述的基因多态性检测方法，其特征在于含有标记碱基的引物延伸产物以单链特异性核酸酶，或3′→5′外切酶消化方式与未延伸引物分离。

10、如权利要求1,5所述的基因多态性检测方法，其特征在于含有标记碱基的引物延伸产物以不同大小分子量截留的分子筛离心方式与没有延伸的引物和dNTPs混合物分离。

11、如权利要求1,5所述的基因多态性检测方法，其特征在于引物延伸产物通过凝胶电泳与未延伸引物和dNTPs混合物分离。