[发明专利]含有聚氧乙烯烷基醚或聚氧乙烯烷基酯以及至少一种非离子表面活性剂的佐剂

说明书

本发明涉及一种新的佐剂系统，包括与至少一种另外的非离子表面活性剂并用的聚氧乙烯烷基醚或聚氧乙烯烷基酯表面活性剂。优选所述另外的非离子表面活性剂是辛苯聚糖(Octoxynol)。本发明提供了所述的新佐剂、包含它们的疫苗、及其制备方法和将其配成疫苗的方法。也提供了本发明的佐剂或疫苗在预防或治疗疾病中的用途。还提供了一种增强使用本发明的佐剂和疫苗的宿主免疫反应的方法。该佐剂用作粘膜佐剂特别有效，但也对全身有效。

除了避开了由于“惧针”而注射疼痛及对患者产生相关副作用的影响之外，粘膜接种疫苗是有吸引力的，因为已经表明对于动物来说，粘膜给予抗原可更高效率促使粘膜表面产生保护性反应，而粘膜表面是许多病原体的进入通道。此外，已经表明粘膜接种疫苗，例如鼻内接种，不仅可在鼻粘膜，而且也在远处粘膜部位引起粘膜免疫性，如生殖器粘膜(Mestecky，1987，《临床免疫学杂志》(Journal of ClinicalImmunology)，7，265-276；McGhee和Kiyono，《传染性药剂及疾病》(Infectious Agents and Disease)，1993，2，55-73)。尽管对这一领域进行了许多研究，适合对人使用的安全和有效的粘膜佐剂仍有待确定。本发明提供了一个解决这一问题的方法。

已经描述了某些非离子表面活性剂的医疗用途。例如，已描述了鼻内给予聚氧乙烯醚和聚氧乙烯酯以增强鼻腔吸收胰岛素(Hirai等1981，《国际药剂学杂志》(International Journal of Pharmaceutics)，9，165-172；Hirai等1981，《国际药剂学杂志》(International Journal ofPharmaceutics)，9，173-184)。

已有聚氧乙烯烷基醚作为油乳液或丙烯酸聚合物佐剂的成分的描述(JP 05 201877；US 3,919,411)。

其它非离子表面活性剂已经被用于疫苗配制剂。例如，包含聚氧乙烯蓖麻油或辛酸/葵酸甘油酯、与聚氧乙烯脱水山梨醇单酯和抗原的混合物的疫苗制剂，在粘膜局部给予之后，能够引起全身免疫反应(WO94/17827)。该专利申请公开了非离子表面活性剂TWEEN20^TM(聚氧乙烯脱水山梨醇单酯)和Imwitor742^TM(辛酸/葵酸甘油酯)联合，或TWEEN20^TM和聚氧乙烯蓖麻油联合使用在鼻内免疫接种后能够增强全身免疫反应。在文献(Gizurarson等1996《疫苗研究》(Vaccine Research)，5，69-75；Aggerbeck等1997，《疫苗》(Vaccine)，15，307-316；Tebbey等，Viral Immunol 1999；12(1)：41-5)中描述了该配制剂针对鼻内给予抗原的免疫反应增强作用的详细情况。

非离子表面活性剂已经以一种方式形成了非离子表面活性剂囊泡(公知的NISV，US 5,679,355)。这种非离子表面活性剂的配制剂，常常在胆固醇存在下，形成双类脂层囊泡，它在内层水相中或双类脂层本身中残存抗原。

国际专利申请WO96/36352(US 5,653,987)描述了一种液体药物制剂，它包含至少两种吸收增强剂和水，主要为口服胰岛素的传送，其中每次吸收增强剂的量是以总配制剂的1-10％w/w的浓度存在。

表面活性剂常常用于油乳剂佐剂的配制剂全身给予，起稳定油液滴的作用。例如，聚氧乙烯脱水山梨醇酯(TWEEN^TM)和脱水山梨醇脂肪酸酯(SPAN^TM)用于稳定水乳胶中的油(EP 0 399 843 B，WO95/17210)。

本申请人在这里给出惊人的发现，聚氧乙烯烷基醚或聚氧乙烯烷基酯，与至少一种另外的非离子表面活性剂并用，一起作为有效的疫苗佐剂发挥作用。有利的是，该组合物可全身给予，但当疫苗组合物采用粘膜给予时，也能有效诱导全身免疫反应。本发明粘膜给予疫苗诱导的免疫反应可能至少与传统疫苗全身注射后观察到的免疫反应一样高。

本发明提供了安全有效的佐剂，它易于生产，并包括至少一种聚氧乙烯烷基醚或聚氧乙烯烷基酯和至少一种另外的非离子表面活性剂。本发明中使用的表面活性剂可以是水溶液或可形成颗粒结构的悬浮液，如囊泡或胶束(micelle)。优选该表面活性剂是水溶液或胶束的形式。

可被配入本发明的疫苗和佐剂的聚氧乙烯醚或酯包括通式(I)的分子：