[发明专利]氨基酸生产的代谢工程

权利要求书

1.生产氨基酸X的微生物C，其中所述微生物C是由下列方法获得的：

 (a)选择以百分比产量Y由右旋糖生成所述氨基酸的亲本微生物A；

 (b)通过选自下组的方法诱变所述亲本微生物A以产生微生物B：

     (i)随机化学诱变；和

     (ii)ilvBN操纵子的rDNA诱变；

 (c)由步骤(b)选择一种或多种支链氨基酸亮氨酸、异亮氨酸、和缬氨酸营养缺陷型或营养徐缓型的至少一种经诱变微生物B；并

 (d)由步骤(c)选择以百分比产量Z由右旋糖生成所述氨基酸X的至少一种微生物C，其中所述百分比产量Z比所述百分比产量Y更高。

2.权利要求1的微生物C，其中氨基酸X选自下组：

 (a)甘氨酸；

 (b)丙氨酸；

 (c)甲硫氨酸；

 (d)苯丙氨酸；

 (e)色氨酸；

 (f)脯氨酸；

 (g)丝氨酸；

 (h)苏氨酸；

 (i)半胱氨酸；

 (j)酪氨酸；

 (k)天冬酰胺；

 (l)谷氨酰胺；

 (m)天冬氨酸；

 (n)谷氨酸；

  (o)赖氨酸；

  (p)精氨酸；和

  (q)组氨酸。

3.权利要求2的微生物C，其中微生物A选自下组：

  (a)棒杆菌属；

  (b)短杆菌属；和

  (c)大肠杆菌。

4.权利要求3的微生物C，其中微生物B是缬氨酸和异亮氨酸营养缺陷型或营养徐缓型。

5.权利要求3的微生物C，其中步骤(b)诱变是随机化学诱变。

6.权利要求3的微生物C，其中步骤(b)诱变是ilvBN操纵子的定点诱变。

7.具有下列特征的微生物棒杆菌属菌株：

 (a)一种或多种支链氨基酸异亮氨酸、亮氨酸、和缬氨酸营养缺陷型或营养徐缓型；

 (b)在培养基中培养时生成选自下组的氨基酸：

     (i)甘氨酸；

     (ii)丙氨酸；

     (iii)甲硫氨酸；

     (iv)苯丙氨酸；

     (v)色氨酸；

     (vi)脯氨酸；

     (vii)丝氨酸；

     (viii)苏氨酸；

     (ix)半胱氨酸；

     (x)酪氨酸；

     (xi)天冬酰胺；

     (xii)谷氨酰胺；

     (xiii)天冬氨酸；

   (xiv)谷氨酸；

   (xv)赖氨酸；

   (xvi)精氨酸；和

   (xvii)组氨酸；

且

 (c)由右旋糖生成步骤(b)氨基酸的百分比产量为至少大约30％。

8.权利要求7的微生物，其特征还包括ilvBN操纵子中的突变。

9.权利要求8的微生物，其中ilvBN操纵子中的突变是缺失、插入、或点突变。

10.权利要求9的微生物，其中ilvBN操纵子中的突变特征为序列SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：5。

11.具有NRRL保藏物编号B-30149的鉴定特征的微生物棒杆菌菌株。

12.具有NRRL保藏物编号B-30150的鉴定特征的微生物棒杆菌菌株。