[发明专利]治疗慢性乙型肝炎病毒感染的方法

说明书

发明领域

本发明涉及治疗慢性乙型肝炎病毒(“HBV”)感染和疾病的免疫治疗剂。

发明背景

85％以上儿童HBV感染变成慢性。成人中1-5％急性HBV感染不能治愈，也变为慢性感染。慢性感染可导致慢性活动性肝炎(20-50％的病例)、肝硬化或甚至肝功能衰竭(10-20％的病例)，在某些情况下导致肝癌(1-3％的病例)。肝脏损伤主要是对感染的肝细胞的细胞免疫应答引起的。

仅在美国就有约一百万HBV的慢性携带者。全世界有300,000,000以上的慢性携带者。许多慢性携带者在泛太平洋地区(即台湾、日本、南亚)和非洲。

引起慢性HBV感染的机制尚不清楚。乙型肝炎e-抗原(“HBeAg”或“HBe”，前核心多肽)的存在与活动性病毒复制有关，是感染性增加和严重性的指标。虽然如果患者是抗-HBe阳性预后较好，但是急性和慢性感染的恢复都与产生针对乙肝表面抗原(“HBsAg”或“HBs”)的抗体有关。随着中和性抗-HBs抗体的出现，HBsAg消失是感染清除的指标。然而，对抗HBs的自发性血清转化现象极其罕见。虽然每年有10％的患者经历了HBeAg到抗-HBe的自发血清转化，但是由HBs血清转化成抗HBs每年仅发生在约1％的患者中。

虽然已有治疗慢性HBV的疗法，但是大多数范围和效力都有限。干扰素治疗仅在3-5％患者中导致抗HBs血清转化。另外，干扰素治疗非常昂贵，可能具有严重的副作用，而且必须每日皮下注射。

更新的抗病毒药物，如拉米夫定可减少病毒负荷，但仅在少数病人中导致抗HBs血清转化。另外，它们必须长期使用-中断会导致病毒重新出现，使得可能需要终生治疗-而且可能出现耐药性突变株。

也已有免疫疗法。一些免疫疗法基于抗体的施用。当单独使用抗HBs抗体(“HBIG”)时，可具有治疗作用，如肝脏移植对HBV感染所证明的那样。蛋白质设计实验室(Protein Design Labs)正致力于使用人源化抗HBs抗体作Ig灌注治疗。

其他免疫疗法基于抗原施用。一种基于抗原的免疫疗法利用了酵母表达的HBsAg和油/水乳液加RIBI和QS-21(SmithKline Beecham)。目前正在进行慢性感染的二期试验。另一种利用PreS1+PreS2+S/明矾(Medeva)。还有另一种(现在正进行150个病人的免疫疗法试验)使用PreS2+S/明矾(Institut Pateur)。另一种基于抗原的免疫疗法利用核心蛋白衍生的肽，用于诱导细胞毒性T淋巴细胞应答(Cytel)。

仍然需要能改善慢性HBV感染的强效免疫疗法。

发明简述

在一方面，本发明涉及治疗慢性HBV感染的方法，包括施用一种组合物，该组合物含有HBsAg的重组PreS2+S蛋白质和一种可代谢的油佐剂，和可任选的抗病毒药物或化合物。

另一个方面，本发明涉及一种免疫治疗药盒，它包括HBsAg的PreS2+S蛋白质、一种可代谢的油佐剂和可任选的抗病毒药物或化合物。

附图简述

图1描述了具有感兴趣的限制性位点的HBV基因组和用于制备表达质粒的接头。

图2示意性描述了该克隆策略。

图3a-b、4a-b和5a-b描述了三个病人的HBe/抗HBe(a)和血清ALT/HBV DNA(b)结果，第二个病人显示短时突发加剧。

发明详述

本发明的实施可采用(除非另外说明)病毒学、免疫学、微生物学、分子生物学的常规方法和本领域的重组DNA技术。这些技术在文献中已有全面论述，见例如Sambrook等，Molecular Cloning：A Laboratory Manual(第二版，1989)；DNAcloning：A Practical Approach，卷I&II(D.Glover编)；Methods In Enzymology(S.Colowick和N.Kaplan编，Academic Press，Inc.)；Handbook of ExperimentalImmunology，卷I-IV(D.M.Weir和C.C.Blackwell编，Blackwell ScientificPublications)和Fundamental Virology，第二版，卷I&II(B.N.Fields和D.M.Knipe编)。