[发明专利]生物活性材料的保存方法

权利要求书

1.保存生物活性材料的方法，包括将该生物活性材料的水悬浮液与脱乙酰壳多糖或其无毒性盐的无菌水溶液相混合，以形成该生物活性材料和脱乙酰壳多糖或其无毒性盐的团聚体；在该团聚体中加入海藻糖无菌水溶液；在低于大气压的压力下，在温度最初不超过37℃，并且被随后控制不降低至0℃或更低的条件下，对该团聚体和海藻糖的无菌混合物进行干燥，以形成包含亚稳定玻璃样海藻糖的玻璃样多孔基质，在该基质中含有干燥的生物活性材料和脱乙酰壳多糖或其无毒性盐。

2.根据权利要求1的方法，其中该生物活性材料选自病毒、细菌、三级结构生物活性蛋白质和核酸。

3.根据权利要求2的方法，其中该生物活性材料是至少一种选自牛瘟病毒、小反刍动物瘟疫病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、风疹病毒、黄热病毒、脊髓灰质炎病毒和新城疫病毒的病毒。

4.根据权利要求2的方法，其中该生物活性材料是牛接触感染性胸膜肺炎(CBPP)支原体。

5.根据权利要求1-4之任一项的方法，其中脱乙酰壳多糖或其无毒性盐的无菌水溶液具有0.01％w/v的脱乙酰壳多糖浓度。

6.根据权利要求5的方法，其中脱乙酰壳多糖无菌水溶液和生物活性材料的水悬浮液按1∶1的体积比在pH7.4混合。

7.根据权利要求1-6之任一项的方法，其中对生物活性材料和脱乙酰壳多糖的团聚体进行涡旋混合。

8.根据权利要求1-7之任一项的方法，其中将该生物活性材料和脱乙酰壳多糖的团聚物与具有0.20-20％w/v海藻糖浓度的海藻糖无菌水溶液混合。

9.根据权利要求8的方法，其中该海藻糖无菌水溶液具有2.5-8％w/v的海藻糖浓度。

10.根据权利要求9的方法，其中该海藻糖无菌水溶液具有约5％w/v的海藻糖浓度。

11.根据权利要求1-10之任一项的方法，其中在低于大气压的压力下，在温度最初不超过37℃，并且被控制不降低至0℃或更低，最终不超过40℃的条件下，对该团聚体和海藻糖的混合物进行30-60分钟的干燥，以形成包含玻璃样海藻糖的、残留水分含量不超过10％的玻璃样多孔基质，在该基质中含有干燥的生物活性材料和脱乙酰壳多糖或其无毒性盐。

12.根据权利要求1-11之任一项的方法，其中该干燥阶段在不超过800mbar的压力下进行。

13.根据权利要求1-12之任一项的方法，其中在不超过0.1mbar的压力下，在温度最终处于40-45℃范围内的条件下，将所获的含有干燥生物活性材料和脱乙酰壳多糖或其无毒性盐的海藻糖基质进行10-30个小时的第二次干燥，以形成其中含有干燥生物活性材料和脱乙酰壳多糖或其无毒性盐的、残留水分含量不超过2％的海藻糖基质。

14.根据权利要求12的方法，其中第二次干燥进行20-30个小时。

15.根据权利要求13的方法，其中第二次干燥在约37℃的温度下进行15-17个小时，并且之后该温度在第二次干燥的剩余时间内逐渐上升，达到40-45℃的最终温度。

16.根据权利要求12-14之任一项的方法，其中在该第二次干燥的步骤结束时残留水分含量为1.0％或更低。

17.制备疫苗的方法，包括根据权利要求1-15的方法保存生物活性材料，并将由此获得的玻璃样产品重现水化在适当的水性介质中。

18.根据权利要求16的方法，其中该疫苗用于口服或鼻内使用。

19.根据权利要求17的方法，其中该疫苗是麻疹、腮腺炎、风疹(MMR)疫苗。

20.可重新水化的组合物，其含有亚稳定玻璃基质形式的海藻糖，在该基质中含有干燥的生物活性材料和脱乙酰壳多糖或其无毒性盐。

21.根据权利要求19的可重新水化组合物，其具有不超过2％的残留水分含量。

22.根据权利要求20的可重新水化组合物，其具有不超过1％的残留水分含量。

23.根据权利要求19-21之任一项的可重新水化组合物，当重新水化时用于制备疫苗。