[发明专利]用转化的微藻生物合成外源蛋白质

权利要求书

1.在微藻中生物合成所需外源蛋白质的方法，所述方法包括下列步骤：

(i)获得微藻的原生质体；

(ii)制备含编码所需外源蛋白质之基因的载体，所述基因源自微藻以外的生物；

(iii)将所述载体导入原生质体以得到转化的原生质体；和

(iv)培养转化的微藻以生产所需的蛋白质。

2.根据权利要求1的方法，该方法还包括在培养步骤后从所述微藻回收所述蛋白质的步骤。

3.根据权利要求1的方法，其中所述方法还包括在步骤(iii)与步骤(iv)之间用抗生素筛选转化细胞的步骤。

4.根据权利要求1的方法，其中所述方法还包括在步骤(iii)与步骤(iv)之间使转化的原生质体再生细胞壁的步骤。

5.根据权利要求3的方法，其中所述载体含有Sh ble基因作为转化体的选择性标记，且其中抗生素选自腐草霉素、他利霉素、博莱霉素和zeomycin。

6.根据权利要求1的方法，其中所述载体含有选自花椰菜花叶病毒35S启动子和衣藻RBCS2基因启动子的启动子。

7.根据权利要求1的方法，其中所述微藻是来自海洋和活水的小球藻属，衣藻属、团藻属、Cheatoceros、普哈特属、骨条藻属、舟形藻属、Caloneise、菱形藻属、海链藻属、双眉藻属、Nannochloris、Nannochloropsis、Tetraselmis、杜氏藻属、Spirulina、微孢藻属、Oscillatoria、Tricodesminus、Isochryosis、Pavlova或Dinophyceae中的一种。

8.根据权利要求1的方法，其中所述所需的外源蛋白质源自细菌、真菌、病毒、动物、植物或鱼。

9.根据权利要求8的方法，其中所述所需的外源蛋白质是鲆生长激素。

10.用于在微藻中生物合成所需的外源蛋白质的重组DNA载体，所述载体含有编码所需外源蛋白质的基因和作为转化体选择性标记的Sh ble基因。

11.用于生物合成所需外源蛋白质的转化的微藻，其中该微藻的基因组与所述所需外源基因和Sh ble基因是整合在一起的。

12.根据权利要求11的转化的微藻，其中所述微藻可表达所需的外源蛋白质和Sh ble蛋白。

13.一种所需外源蛋白质，其是在权利要求11或12所述的转化的微藻中通过所需外源基因的表达而生产的。

14.一种饲养动物的方法，其采用权利要求11的微藻或权利要求13的蛋白质饲养动物。