[发明专利]多肽

说明书

本发明涉及在本文中称为CASB612多核苷酸的多核苷酸、由其编码的多肽(在本文中称为CASB612多肽)、用于其生产的重组材料和方法。另一方面，本发明涉及使用这样的多肽和多核苷酸的方法，包括治疗癌症和自身免疫性疾病以及其它相关病症。再一方面，本发明涉及使用本发明提供的材料鉴定激动剂和拮抗剂/抑制剂的方法，以及使用所鉴定的化合物治疗与CASB612失衡有关的病症的方法。进一方面，本发明涉及用于检测与CASB612多肽活性或水平异常有关的疾病的诊断检测。

据认为本发明的多肽和多核苷酸是特异性预防或治疗肿瘤的重要免疫原，因为与正常细胞相比，它们在肿瘤中特异性表达或高度过量表达，因此可成为抗原特异性免疫机制的靶，从而破坏肿瘤细胞。它们还可以用于肿瘤细胞的诊断。此外，它们在某些情况下的不适当表达可诱导自身免疫性不适当的免疫反应，而这可以通过使用同样的多肽或多核苷酸进行适当接种而得到矫正。这一方面，达到目的的最重要生物活性是本发明多肽的抗原活性和免疫原性活性。本发明多肽还可以具有CASB612多肽的至少一种其它生物活性，这一点使它能够成为与免疫反应无关的治疗性干预靶或预防性干预靶。

功能基因组学非常依赖于高通量DNA测序技术以及从目前许多分子生物学数据库鉴定具有潜在价值的基因序列的各种生物信息学工具。可以使用最近发展的扣除克隆策略，构造富集与特定组织或生理状况相关的基因的cDNA文库。此外，可以使用合适的电子筛选方法鉴定见于某些组织的文库而在其它组织的文库中没有的cDNA。高通量基于基因组或基因的生物学使得能够使用新方法鉴定和克隆有效免疫反应的靶基因，以对疾病如癌症和自身免疫进行预防和疫苗治疗。

第一方面，本发明涉及CASB612多肽。这样的肽包括分离的多肽，所述多肽包含在SEQ ID NO：2的全长上与SEQ ID NO：2的氨基酸序列有至少70％同一性、优选至少80％同一性、更优选至少90％同一性、更优选至少95％同一性、最优选至少97-99％同一性的氨基酸序列。这样的多肽包括包含SEQ ID NO：2的氨基酸的多肽。

本发明的其它肽包括分离的多肽，其氨基酸序列在SEQ ID NO：2的全长上与SEQ ID NO：2的氨基酸序列有至少70％同一性、优选至少80％同一性、更优选至少90％同一性、更优选至少95％同一性、最优选至少97-99％同一性。这样的多肽包括SEQ ID NO：2的多肽。

本发明的其它肽包括分离的多肽，所述多肽由包含SEQ ID NO：1中序列的多核苷酸编码。

本发明还提供CASB612多肽的免疫原性片段，所述片段是CASB612多肽的连续部分，与包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列的多肽具有相同或相似免疫原性特性。这就是说，所述片段(如果必要，当缀合到一种载体上时)能够引起识别CASB612多肽的免疫反应。这样一种免疫原性片段可以包括，例如缺乏N-末端前导序列、跨膜结构域或C-末端锚定结构域的CASB612多肽。在一个优选的方面，依照本发明的CASB612免疫原性片段包含在SEQ ID NO：2的全长上与SEQ ID NO：2的多肽有同一性的多肽的基本所有胞外结构域，所述同一性为至少70％、优选至少80％、更优选至少90％、更优选至少95％、最优选至少97-99％。

本发明多肽或免疫原性片段可以是“成熟”蛋白形式，或者可以是更大的蛋白如前体或融合蛋白的一部分。包括包含以下序列的额外氨基酸序列通常是有利的：分泌序列或前导序列、原序列(pro-sequence)、有助于纯化的序列如多组氨酸残基、或在重组产生过程中有利稳定性的其它序列。此外，也可以考虑添加外源多肽或脂质尾或多核苷酸序列以增加最终分子的免疫原性潜力。

一方面，本发明涉及遗传工程的可溶融合蛋白，所述融合蛋白包含本发明多肽或其片段，以及不同免疫球蛋白亚族(IgG、IgM、IgA、IgE)的重链或轻链的恒定区的不同部分。作为免疫球蛋白，优选的是人类IgG(特别是IgGl)的重链的恒定部分，其中在绞链区融合。在一个特定实施方案中，可以通过加入可用凝血因子Xa切除的切割序列就可除去Fc部分。此外，本发明涉及通过遗传工程制备这些融合蛋白的方法，以及这些融合蛋白在药物筛选、诊断和治疗中的应用。本发明的再一方面还涉及编码这样的融合蛋白的多核苷酸。在国际专利申请号WO94/29458和WO94/22914中可以找到融合蛋白技术实例。