[发明专利]在宿主生物体中可控性收获后生产蛋白质的方法无效

专利信息
申请号: 00803004.9 申请日: 2000-09-05
公开(公告)号: CN1362996A 公开(公告)日: 2002-08-07
发明(设计)人: 克劳斯·迪林;洛伦茨·比洛 申请(专利权)人: MPB分子植物及蛋白质生物技术科隆有限公司
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;A01H5/00
代理公司: 永新专利商标代理有限公司 代理人: 林晓红
地址: 德国*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 宿主 生物体 可控性 收获 生产 蛋白质 方法
【权利要求书】:

1、一种从转基因宿主生物体体中获得所需蛋白质的方法,其中编码这种蛋白质的基因只有在宿主生物体收获后才表达,所述方法的特征为:

(a)转基因生物宿主中含有编码所需蛋白质的基因,且该基因仅在化学诱导剂存在时表达;以及

(b)与化学诱导剂的接触是在宿主生物体收获后通过宿主生物体周围的相而发生。

2、根据权利要求1的方法,其中相为气相。

3、根据权利要求1的方法,其中相为液相。

4、根据权利要求2的方法,其中步骤(b)包括改变宿主生物体周围的气相,用诱导剂溶液(悬浮液)雾化或用挥发性诱导剂灌溉。

5、根据权利要求3的方法,其中步骤(b)包括用病毒悬浮液感染。

6、根据权利要求1至5中任一项的方法,其中编码所需蛋白质的基因与一诱导性启动子有功能地连接。

7、根据权利要求2、4、6中任一项的方法,其中气相的改变为除氧,且启动子是在有氧情况下没有活性的启动子。

8、根据权利要求7的方法,其中启动子为GapC4启动子。

9、根据权利要求2、4、6中任一项的方法,其中步骤(b)中与化学诱导剂的接触经雾化诱导剂RH5992进行。

10、据权利要求1至3中任一项的方法,其中通过补偿转录和/或翻译的功能抑制来诱导编码所需蛋白质的基因的表达。

11、根据权利要求10的方法,其中编码所需蛋白质的基因与一个启动子有功能地连接,从而在启动子与基因之间插入一个核酸序列,该核酸序列具有以下特征:

(a)其阻断所述基因的转录和/或翻译;以及

(b)其可以在诱导后被切除,从而使所述基因表达。

12、根据权利要求11的方法,其中所述核酸是可以被诱导性重组酶切除的核酸。

13、根据权利要求12的方法,其中可切除的核酸和重组酶为重组酶-LBD系统的组成部分。

14、根据权利要求1至3中任一项的方法,其中通过补偿转录、转录后、翻译或翻译后抑制蛋白的作用而表达编码所需蛋白质的基因。

15、根据权利要求1至14中任一项的方法,其中所述方法为至少两种权利要求6、10、11和14中定义的方法的组合。

16、根据权利要求1至15中任一项的方法,其中转基因生物体为实用植物。

17、根据权利要求16的方法,其中实用植物为小麦、大麦、玉米、甜菜、甘蔗、马铃薯、十字花科、豆科植物或烟草。

18、根据权利要求1的宿主生物体,其含有编码所需蛋白质的基因,且该基因仅在化学诱导剂存在时表达。

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