[发明专利]海水鱼二联弧菌灭活疫苗的制备方法

权利要求书

1、海水鱼二联弧菌灭活疫苗的制备方法是

(1)将从病鱼体内分离的鳗弧菌和付溶血弧菌，分别接种到2216-E固体培养基斜面上，并在28±0.2℃下培养3-4天；

(2)然后将高压灭菌后的2216-E液体培养基注入无菌的生物反应器中，鳗弧菌和付溶血弧菌分别培养，反应温度保持30±0.2℃，搅拌速度为600rpm，通气量为4L/min，培养24小时左右，反应器内溶氧趋于平衡时，菌体量达到高峰，停止反应；

(3)取出菌液，加入0.5％(v/v)福尔马林液，静置24小时；

(4)静置后，以4000rpm离心15分钟，分别收集沉积的、得到灭活后的付溶血弧菌和鳗弧菌；

(5)将两种灭活的菌体按1∶1比例混合制成二联弧菌灭活疫苗。

2、根据权利要求1所述的使用方法，其特征是可将制成的疫苗，即将灭活的鳗弧菌和付溶血弧菌二联疫苗进行现场的投喂免疫：将两种灭活疫苗各1克，加入每千克鱼体重所需的饲料中混匀，连续投喂10天。

3、根据权利要求1所述的使用方法，其特征还在于可以是浸泡免疫：将冻结的疫苗融化后，用海水稀释1000倍，用稀释后的疫苗25升浸泡50尾成鱼或80尾幼鱼，浸泡时间为5分钟左右。