[发明专利]基因工程制备菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶的方法无效
| 申请号： | 99113878.3 | 申请日： | 1999-07-15 |
| 公开（公告）号： | CN1088106C | 公开（公告）日： | 2002-07-24 |
| 发明（设计）人： | 陈海宝;唐功利 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海有机化学研究所 |
| 主分类号： | C12N9/90 | 分类号： | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12N15/67;C12P21/02 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 李昌群,邬震中 |
| 地址： | 20003*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程制备菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶的方法。通过设计合成的寡核苷酸引物，经过反转录聚合酶链式反应RT-PCR获得了菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶TPI基因后使之克隆入质粒并置于用计算机辅助设计的基因表达调控顺序的蛋白质生物合成引发区域的特定顺序控制下，在大肠杆菌中可使得目的蛋白TPI的表达量高达菌体总蛋白的36％，经分离纯化后可获得纯度达95％以上的活性TPI。该基因工程所得TPI与天然分离的TPI区别在于该基因工程酶的高纯度，不沾污植物中共生的其他相关酶，适于特殊的生物医学研究对纯品之需求。 | ||
| 搜索关键词： | 基因工程 制备 菠菜 叶绿体 磷酸酯 异构化酶 方法 | ||
【主权项】：
1、一种基因工程制备菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶的方法，其特征在于获得天然TPI基因后，通过计算机辅助设计对该基因进行改造得到相应的克隆质位及表达质粒，然后在大肠杆菌中表达出菠菜叶绿体三糖磷酸酯异构化酶。
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