[发明专利]降低了吸附能力以及增加了水解能力的枯草杆菌蛋白酶BPN变体

摘要

本发明涉及枯草杆菌蛋白酶ＢＰＮ′变体，该变体在第１９９－２２０位中含有与野生型枯草杆菌蛋白酶ＢＰＮ′不相同的至少一个或多个氨基酸位置（即替代），从而该ＢＰＮ′变体与野生型枯草杆菌蛋白酶ＢＰＮ相比降低了对不溶性底物的吸附作用并增加了水解不溶性底物的能力。

主权项

1.一种分离的具有经修饰的野生型氨基酸序列的BPN′变体，其特征在于在经修饰的氨基酸序列的第199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、218、219或220位中的一个或多个位置上的氨基酸被替代，其中a.如果替代发生在第199位，则替代氨基酸是Cys、Ala、His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；b.如果替代发生在第200位，则替代氨基酸是His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；c.如果替代发生在第201位，则替代氨基酸是Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；d.如果替代发生在第202位，则替代氨基酸是Pro、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；e.如果替代发生在第203位，则替代氨基酸是Met、Cys、His、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；f.如果替代发生在第204位，则替代氨基酸是Glu；g.如果替代发生在第205位，则替代氨基酸是Leu、Met、Cys、Ala、His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；h.如果替代发生在第206位，则替代氨基酸是Pro、Asn或者Ser；i.如果替代发生在第207位，则替代氨基酸是Asp或者Glu；j.如果替代发生在第208位，则替代氨基酸是Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；k.如果替代发生在第209位，则替代氨基酸是Ile、Val、Met、Cys、Ala、His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；l.如果替代发生在第210位，则替代氨基酸是Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；m.如果替代发生在第211位，则替代氨基酸是Ala、Pro、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；n.如果替代发生在第212位，则替代氨基酸是Gln、Ser、Asp或者Glu；o.如果替代发生在第213位，则替代氨基酸是Trp、Phe、Tyr、Leu、Ile、Val、Met、Cys、Ala、His、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；p.如果替代发生在第214位，则替代氨基酸是Phe、Leu、Ile、Val、Met、Cys、Ala、His、Pro、Gly、Gln、Asn、Asp或者Glu；q.如果替代发生在第215位，则替代氨基酸是Thr、Pro、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；r.如果替代发生在第216位，则替代氨基酸是His、Thr、Pro、Gly、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；s.如果替代发生在第218位，则替代氨基酸是Glu；t.如果替代发生在第219位，则替代氨基酸是Pro、Gln、Asn、Ser、Asp或者Glu；以及u.如果替代发生在第220位，则替代氨基酸是Pro、Gly、Gln、Asn、Asp或者Glu；其特征在于BPN′变体与野生型枯草杆菌蛋白酶BPN′相比其降低了对不溶性底物的吸附作用并且增加了对不溶性底物的水解作用。