[发明专利]从体液中提取纤维结合蛋白的生产工艺

摘要

本发明属生物学医学中提取纤维结合蛋白的生产工艺。本发明应用单独的苯甲磺酰氟抑制蛋白酶活性，并用琼脂糖凝胶白明胶亲和层析技术一步层析，从人及动物体液(血液、羊水、组织液)中提取可应用于生物学医学研究、实验、医学临床及化妆美容的大分子糖蛋白——纤维结合蛋白(Fibronectin，Fn)。本发明的生产工艺提取纤维结合蛋白，成本低廉，产品纯度高，生产工艺简单稳定，提取率高。

主权项

1、一种从体液中提取纤维结合蛋白的生产工艺，包括获取体液，蛋白酶抑制及超速低温离心，琼脂糖凝胶白明胶亲和层析，提取的纤维结合蛋白过滤、计量、无菌冻干，及纤维结合蛋白的生物学功能检测，其特征在于：(1)获取体液后，立即加入1/10的3-10%枸橼酸钠溶液抗凝，同时用0.1～0.3mol/L的苯甲磺酰氟抑制蛋白酶活性，并保持在0.4℃，然后在0±1℃，以7，500～25，000转/分的转速，超速离心10～40分钟，取上清液。(2)将白明胶偶联于溴化氰活化的琼脂糖凝胶上，活化液主要含0.1～0.2mol/L四硼酸钠，然后用主要含0.5～1mol/LTris-HCl，0.1～0.2mol/LPMSF和0.5～5%NaCl溶液的缓冲液A平衡琼脂糖凝胶白明胶亲和层析柱。加样品于亲和层析柱。紫外分光光度计监测，用含3～8mol/L脲的缓冲液B洗脱纤维结合蛋白。整个亲和层析过程应在0～5℃进行。