[发明专利]一种基于无缝克隆技术的全新质粒定点突变方法在审
| 申请号： | 202211714275.2 | 申请日： | 2022-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN115927546A | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 武志强 | 申请（专利权）人： | 北京海创科业生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6827 | 分类号： | C12Q1/6827 |
| 代理公司： | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人： | 李娜 |
| 地址： | 100000 北京市房*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于无缝克隆技术的全新质粒定点突变方法、试剂盒及应用，属于基因工程技术领域。基于无缝克隆原理优化方法，目标突变点设计在引物5′端，可插入50bp以内的连续位点或间隔位点突变操作，50bp以内的插入突变相较于其他突变方法进一步提升；可进行单点或多点突变(最多5个间隔位点)的替换点突变；可以进行无长度序列限制的删除点突变操作。该方法解决了质粒模板必须被甲基化的限制问题，通过使用极低的模板使用量1ng和极高的PCR扩增效率，使突变后的产物以极高的比例压制未被突变的模板质粒，此方法效率极高。使用该方法定点突变质粒不需要购买昂贵的商业化试剂盒，经济成本很低，适用范围更广。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 无缝 克隆技术 全新 质粒 定点 突变 方法 | ||
【主权项】：
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