[发明专利]用于水稻基因编辑的MAD7-NLS融合蛋白、载体及其应用在审
申请号: | 202211695732.8 | 申请日: | 2022-12-28 |
公开(公告)号: | CN116103266A | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 王高华;邹洪锋;段芳;谢先荣;刘伟智 | 申请(专利权)人: | 武汉艾迪晶生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/113;C12N15/62;C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/46 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 徐瑛 |
地址: | 430074 湖北省武汉市*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于水稻基因编辑的MAD7‑NLS融合蛋白、载体及其应用,MAD7蛋白的N端增加1个核定位信号肽氨基酸序列,在C端增加1个核定位信号肽氨基酸序列,得到MAD7‑NLS融合蛋白。MAD7‑NLS融合蛋白的CrRNA表达盒子包括基因编辑靶点、启动子和MAD7蛋白的两种CrRNA序列,分别为35nt‑CrRNA和21nt‑CrRNA,CrRNA的核苷酸序列3’端分连接有1个tRNA序列。在水稻遗传转化筛选阶段42℃处理4h水稻愈伤组织能够显著的提高MAD7核酸酶的基因编辑效率,MAD7突变类型多数为6‑50nt的删除。完整表达载体含有上述CrRNA表达盒子和MAD7‑NLS融合蛋白的核苷酸序列,上述表达载体能够高效实现水稻基因的敲除编辑。 | ||
搜索关键词: | 用于 水稻 基因 编辑 mad7 nls 融合 蛋白 载体 及其 应用 | ||
【主权项】:
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