[发明专利]用于水稻基因编辑的MAD7-NLS融合蛋白、载体及其应用在审

专利信息
申请号: 202211695732.8 申请日: 2022-12-28
公开(公告)号: CN116103266A 公开(公告)日: 2023-05-12
发明(设计)人: 王高华;邹洪锋;段芳;谢先荣;刘伟智 申请(专利权)人: 武汉艾迪晶生物科技有限公司
主分类号: C12N9/22 分类号: C12N9/22;C12N15/113;C12N15/62;C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 代理人: 徐瑛
地址: 430074 湖北省武汉市*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明公开了一种用于水稻基因编辑的MAD7‑NLS融合蛋白、载体及其应用,MAD7蛋白的N端增加1个核定位信号肽氨基酸序列,在C端增加1个核定位信号肽氨基酸序列,得到MAD7‑NLS融合蛋白。MAD7‑NLS融合蛋白的CrRNA表达盒子包括基因编辑靶点、启动子和MAD7蛋白的两种CrRNA序列,分别为35nt‑CrRNA和21nt‑CrRNA,CrRNA的核苷酸序列3’端分连接有1个tRNA序列。在水稻遗传转化筛选阶段42℃处理4h水稻愈伤组织能够显著的提高MAD7核酸酶的基因编辑效率,MAD7突变类型多数为6‑50nt的删除。完整表达载体含有上述CrRNA表达盒子和MAD7‑NLS融合蛋白的核苷酸序列,上述表达载体能够高效实现水稻基因的敲除编辑。
搜索关键词: 用于 水稻 基因 编辑 mad7 nls 融合 蛋白 载体 及其 应用
【主权项】:
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